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gaoshandian1

金虫 (小有名气)

[交流] 原位杂交组织化学常用试剂及处理2

三)硅化

  【方法1】(1)将一扎新的盖玻片散开,在通风条件下于0.1mol/L的HCI中煮20min,等其冷却后,倒掉盐酸。

  (2)用去离子水沉漂洗玻片,竖放在架子上自然干燥。

  (3)硅化盖玻片:通风条件下,将单块的盖玻片在二甲二氯硅浣(dimethyldichorsilane,DMDC)液中浸几下,竖入在架子上干燥。

  (4)收集干燥的盖玻片于一可耐热的petri氏盘(或培养皿)中,用去离子水漂洗数次,彻底清洗。

  (5)用铝箔将装有盖玻片的培养皿包好,于180℃烘烤4h过夜。取出待冷至室温后,即可进行后续处理。

  附:2%DMDC



  配制:按比例两者充分混匀,静止待气泡消失即可使用。

  用途:硅化玻片(载片、盖片均可)。

  【方法2】将经过洗净的玻璃盖片分散开放在一金属网中,并将该网放入一接有真空泵的干燥器中。同时,在干燥器中放一盛有约1m二甲二氯硅浣(dimethyldiorosilane,DMDC)的小烧杯。盖好干燥器(确保密闭),抽真空约5min,然后让空气冲入。取出盛有盖片的金属网架,用锡箔纸包埋,于250℃以上烘烤4h以上,最好过夜。冷却后备用。 

  本法可用于玻璃及塑料器皿的硅化。塑料器皿只能于60℃烧干。

  【方法3】APES(氨丙基三乙氧基硅浣)法



  【方法4】

  (1)49ml氯仿与1mg二甲二氯硅浣(DMDC)配液;

  (2)倒入每个拟硅化的试管或离心管中,浸泡5min后用乙醇或重蒸水冲洗;

  (3)玻璃器皿使用前位于180℃以上烘烤2h以上,塑料器皿应于60℃烘烤过夜。

  注意:DMDC有毒且高度挥发,应于通风环境操作并戴口罩、手套,避免接触皮肤或吸入。
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1

2楼2006-05-04 10:04:51
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