24小时热门版块排行榜    

查看: 1452  |  回复: 2

gdongli8325

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】构建超表达载体时引物的设计

因为之前所用的试剂盒的原因,设计引物时需要在引物前多加四个碱基,现在要另换试剂盒,不知道这四个多出的碱基是否会造成阅读框位移? 此外,想了解一个最基本的问题:在5,UTR设计引物构建超表达载体时,是不是从引物开始到ATG必须是3的倍数,这样才不会造成阅读框位移?我的观点是,因为DNA先要转录成RNA,然后才翻译成蛋白,所以即使不是三的倍数,也不会造成位移。 希望了解的同学给予答复。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


silicare(金币+1):谢谢参与 2010-09-13 12:15:40
gdongli8325(金币+5): 2010-09-13 16:27:12
换了试剂盒,换了载体吗?如果换了载体就要比对一下新的载体的序列

构建表达载体,楼主使用的是待表达基因的ATG还是载体的ATG,如果是载体的,就要注意载体ATG和表达基因的ATG之间的序列要是3的倍数,如果不是要用引物来调整,如果是使用自己的ATG,那就不用考虑了。这跟先转录后翻译没有关系,因为转录的片段比载体的表达阅读框要长,翻译还是从第一个ATG开始的
2楼2010-09-12 22:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech113

铜虫 (初入文坛)

gdongli8325(金币+2): 2010-09-13 16:27:23
楼上正解!
不抛弃,不放弃!
3楼2010-09-13 11:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gdongli8325 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +10 archvillain 2026-08-04 12/600 2026-08-10 12:45 by yudaoqian88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +5 家与远方 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:45 by 家与远方
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +16 且听虎啸 2026-08-07 23/1150 2026-08-10 12:35 by majunge000
[基金申请] FileCode能看出啥? +3 要乐观耀哥 2026-08-10 6/300 2026-08-10 12:33 by 要乐观耀哥
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +9 yufeiwaner 2026-08-09 9/450 2026-08-10 12:25 by 流流伤
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +12 Lanmanbaby 2026-08-09 20/1000 2026-08-10 11:51 by 要乐观耀哥
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见