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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何稀释亚油酸
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luyaqing16

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何稀释亚油酸

现在做测定酶活的实验，测定的酶为脂肪氧合酶，测定时需要用到0.25%的亚油酸作为底物。可查了下似乎没有0.25%的亚油酸，请教各位是应该稀释亚油酸到0.25%么，或是别的方法？谢谢各位
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1楼 2010-08-31 08:58:52
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
luyaqing16(金币+2):谢谢你的参与，现在的问题是，我该如何配制0.25%的亚油酸？ 2010-08-31 21:44:52
引用回帖:
Originally posted by luyaqing16 at 2010-08-31 08:58:52:
现在做测定酶活的实验，测定的酶为脂肪氧合酶，测定时需要用到0.25%的亚油酸作为底物。可查了下似乎没有0.25%的亚油酸，请教各位是应该稀释亚油酸到0.25%么，或是别的方法？谢谢各位

应该是将 亚油酸配成0.25%浓度使用吧。
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52187644
2楼2010-08-31 15:04:20
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yunbfly

木虫 (小有名气)
★ ★
silicare(金币+2):谢谢交流 2010-08-31 18:05:14
luyaqing16(金币+4):嗯，对现在我的问题也是该用何种溶剂稀释亚油酸？ 2010-08-31 21:46:14
脂肪酸和油脂是不溶于水的，所以做酶反应可能是将酶反应缓冲液和脂肪酸混合做成乳状液。我估计你这个0.25%可能是亚油酸在乳状缓冲液里的浓度。
另：如果你一定需要0.25%的亚油酸溶液，用乙醚、石油醚、正己烷等有机溶剂稀释。但我估计这些溶液不是拿来做没活力测定的
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3楼2010-08-31 15:30:00
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luyaqing16

金虫 (小有名气)
整个的反应体系是这样的：我先从植物组织中提取粗酶液（脂肪氧合酶），然后与Tris-盐酸溶液混合于液相氧电极里，保持5-10min。再加入0.25%的亚油酸作为底物。这个0.25%的亚油酸我该用何种溶剂去稀释它呢
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4楼2010-08-31 21:55:53
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yunbfly

木虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-09-01 08:32:02
luyaqing16(金币+5): 2010-09-01 09:02:02
首先，你的0.25%应该是反应体系中的亚油酸浓度。所以你不需要管用什么做成0.25%的亚油酸溶液。
第二，你的反应体系应该是一个酶反应缓冲液+亚油酸的水包油的乳状液体系，所以你要考虑的是如何将亚油酸做成乳状液
第三，查脂肪氧合酶测定相关文献，应该可以找到相关的乳化剂。将所有东西按比例加进去，振荡后就应该是乳状液的缓冲反应液了。
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5楼2010-09-01 08:26:27
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js1186097865

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也是用亚油酸测Lox活性，我用吐温20和硼酸盐缓冲液来溶解亚油酸，得到的是乳浊液，可是用来测定酶活时，吸光度呈负数（原理就是随着反应的进行吸光度随产物量的增加而增加），请高人赐教，

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6楼2017-09-09 19:55:34
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匿名

用户注销 (初入文坛)
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7楼2017-09-29 10:00:31
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