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zhhl2981

木虫 (职业作家)

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[交流] 【求助/交流】请教考马斯亮蓝溶液的配置已有3人参与

为什么配置的考马斯亮蓝溶液是蓝色的,正确的应该是棕红色的.

配置步骤为:

将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1 95％乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用蒸馏水补充至200ml

请问哪里出了问题?谢谢

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1楼 2010-08-28 10:10:22

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可为什么

新虫 (初入文坛)

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★
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引用回帖:

12楼: Originally posted by lhj_890 at 2010-10-14 21:39:34
考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4

2×G-250染色液如何配制？是20 mg G-250溶于5 mL 95%乙醇中，加入10 mL 85%磷酸，用蒸馏水稀释至100 mL，不知道乙醇和磷酸的含量是否需要增加。大神务必要回复小白啊

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15楼2015-07-14 16:19:18

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stheaven

铁杆木虫 (小有名气)

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★ ★
silicare(金币+2):很全面 2010-08-28 10:25:11
zhhl2981(金币+2):3q 2010-08-29 09:28:41

你是用来定量还是染色

考马斯亮蓝G250中的G就是Green，偏绿，属于快染，脱色脱的不彻底，主要用于蛋白质测定。它比考马斯亮蓝R250多两个甲基，λmax为590-610nm。染色灵敏度不如R250但比氨基黑高3倍。优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体，能选择地染色蛋白而几乎无本底色。所以常用于需要重复性好和稳定的染色，适于作定量分析。

考马斯亮蓝R250中的R就是Red，偏红，属于慢染，脱色脱的完全，主要用于电泳染色。λmax=560―590nm。染色灵敏度比氨基黑高5倍。尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色。但蛋白质浓度超出一定范围时，对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律，用作定量分析时要注意这点。

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不可以恨这个世界。因为你那么爱它它不会让你失望的。美丽的并非这个世界。而是接受了这个世界的你的眼神。