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[交流]
【求助】100金币求助各位一个HPLC的具体问题。
情况是这样的:小弟在用HPLC研究一个反应的方法学,看看各种不同的条件下哪个产率高。所以对不同反应条件下的反应液进行了HPLC检测。之前,先对标准品进行了条件摸索,最后用甲醇:水=65:35,峰形还可以。
但是在对不同的反应液进行检测时出现一点问题。在其中几种反应条件下,发现反应液的目标峰形竟然呈现双峰,如下图:

最高的那个峰是目标峰。在用标准品进样时,可以确定是一个单峰。而且在其他某些反应条件下,反应液也是一个单峰。如下图:

大家可以看到,对于某几组反应液,是很好的一个单峰。但是在某几组反应液进样时,就变成上述的双峰。
我的几个疑惑是:
1. 紫外吸收值很小,进样量也就30μL,应该不是超载吧。并且标准品都是单峰,吸收值比这个高得多,反应液没理由超载的。
2. 也不大可能是生成了其他与目标产物挨得很近的峰,因为我摸方法学的这个条件,只涉及到产率高低,不会因为条件不同生成其他东西的。
所以想问一下各位虫友,这样的情况怎么解释和处理呢?
[ Last edited by whynotbest on 2010-8-27 at 00:46 ] |
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