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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】100金币求助各位一个HPLC的具体问题。
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whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫

[交流] 【求助】100金币求助各位一个HPLC的具体问题。

情况是这样的：小弟在用HPLC研究一个反应的方法学，看看各种不同的条件下哪个产率高。所以对不同反应条件下的反应液进行了HPLC检测。之前，先对标准品进行了条件摸索，最后用甲醇：水=65:35，峰形还可以。
    但是在对不同的反应液进行检测时出现一点问题。在其中几种反应条件下，发现反应液的目标峰形竟然呈现双峰，如下图：


    最高的那个峰是目标峰。在用标准品进样时，可以确定是一个单峰。而且在其他某些反应条件下，反应液也是一个单峰。如下图：


       大家可以看到，对于某几组反应液，是很好的一个单峰。但是在某几组反应液进样时，就变成上述的双峰。

我的几个疑惑是：
1. 紫外吸收值很小，进样量也就30μL，应该不是超载吧。并且标准品都是单峰，吸收值比这个高得多，反应液没理由超载的。
2. 也不大可能是生成了其他与目标产物挨得很近的峰，因为我摸方法学的这个条件，只涉及到产率高低，不会因为条件不同生成其他东西的。

所以想问一下各位虫友，这样的情况怎么解释和处理呢？

[ Last edited by whynotbest on 2010-8-27 at 00:46 ]
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WorkFinishPublish
1楼 2010-08-27 00:43:17
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xiangfei218

铜虫 (初入文坛)
whynotbest(金币+1): 2010-08-31 16:46:24
支持9楼，有可能是你的定溶液不同引起的，你拿相同的定容液试试，可能就不会出现这样的情况了。有时用水或用有机溶剂作为LC液，差别会很大的。
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爱拼才会赢
36楼2010-08-30 14:36:16
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lf1022

新虫 (初入文坛)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:02:46
溶剂是什么？用流动相来稀释样品试试。会不会是异构体？

[ Last edited by lf1022 on 2010-8-27 at 08:18 ]
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2楼2010-08-27 08:17:16
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loveliangwei

金虫 (小有名气)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:02:55
lz，图二中的峰就是图一中更矮的那个峰，而图一中更高的峰时目标峰，是不是在一些反应液中没有生成你要的目标物！
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3楼2010-08-27 08:21:17
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dingjihua

铁虫 (小有名气)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:03:01
你感觉只是在摸索条件变化，不会有副产物，但是条件变化可能会使副产物增加。一般这样的情况都是出现了副产物引起的。你可以做别的看下，是不是出现了副产物。
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4楼2010-08-27 08:21:41
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