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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 【讨论】细胞活性、毒性、增殖
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anliang

金虫 (正式写手)

关于MTT实验

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
americanyk(金币+1):欢迎讨论！ 2010-09-26 14:35:28
在MTT试验之中，如果甲材料相对于细胞组的吸光度值为120%，而乙材料是95%，那么对于这种结果如何讨论。谢谢
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21楼2010-09-12 19:04:26
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fyw921

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by anliang at 2010-09-12 19:04:26:
在MTT试验之中，如果甲材料相对于细胞组的吸光度值为120%，而乙材料是95%，那么对于这种结果如何讨论。谢谢

甲、乙与对照组差异明显不？甲乙之间差异明显不？
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22楼2010-09-13 09:03:33
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anliang

金虫 (正式写手)
★ ★
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！！ 2010-10-08 14:14:11
差异不明显
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23楼2010-09-13 10:25:38
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kellylucky

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论 2010-09-20 21:38:04
首先应该明确MTT原理。MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
http://hi.baidu.com/csdyg/blog/item/75f5e3d4e36a8e07a08bb767.html
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24楼2010-09-16 09:58:26
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sendysan

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论 2010-09-20 21:38:19
2，4，6
MTT（细胞毒性）和ALP（细胞分化）
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25楼2010-09-20 20:22:16
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dj04164

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sendysan at 2010-09-20 20:22:16:
2，4，6
MTT（细胞毒性）和ALP（细胞分化）

alp 细胞分化？
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26楼2010-09-21 10:54:29
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20032284

至尊木虫 (知名作家)

cc

刚做过实验

再学习一下
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cc
27楼2010-09-26 20:47:00
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summerxgh

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不错，长了见识，学习了不少。
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28楼2010-09-28 00:27:14
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纳米shiny

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！！ 2010-10-08 14:14:33
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-10-30 19:23:27
我也在做关于作为载体的纳米材料的实验，在做MTT实验时就发现随浓度和时间（24,48,72h）的延长，增殖率降低，我开始就以为可能是产生了细胞毒性，但我做流式，做氧化应激实验以及电镜下看细胞状态，发现没有凋亡，也没产生氧化应激，以及电镜下状态也很好，这是不是也验证了dj04164 虫友所说“增殖慢了也未必由于有毒”，不过这是什么原因呢？
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2330881&fpage=0&view=&highlight=&page=1
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29楼2010-09-28 09:53:41
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dj04164

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！！ 2010-10-08 14:14:41
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-10-30 19:23:18
引用回帖:
Originally posted by 纳米shiny at 2010-09-28 09:53:41:
我也在做关于作为载体的纳米材料的实验，在做MTT实验时就发现随浓度和时间（24,48,72h）的延长，增殖率降低，我开始就以为可能是产生了细胞毒性，但我做流式，做氧化应激实验以及电镜下看细胞状态，发现没有凋亡， ...

流式做的凋亡是不是用Annxin V标的？如果是的话PI标记的时间一定要控制好，时间长了PI会向正常细胞内渗透。另外，各种方法标记凋亡都是有窗口的，时间点早了，晚了都看不到，建议这位朋友在选几个时间点做做凋亡，特别是24小时以内的。如果还看不见，既然增值率低了，是不是可以考虑一下周期，看看是不是有check point t阻滞。
再说氧化应激，不知道你是不是H2DCFDA标的氧自由基。如果是的话，这个实验挺不好把握，个人认为，文献里提供的方法有些不太可取， 如用显微镜看，流式做等等。Detection of Reactive Oxygen Species Induced by Radiation in Cells Using the Dichlorofluorescein Assay 这篇文献的处理方法还不错。
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30楼2010-09-28 10:40:18
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