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zhyzx

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于蛋白纯化已有12人参与

大家帮帮忙看看
我最近在纯化一个蛋白,出现了件诡异的事情,以前纯化时目的条带大小的地方有一条很明显的条带,但最近纯化条件一样,怎么在目的条带大小的地方出现了两条条带呢?(这两条条带离得很近)

急!请各位同仁解答!谢谢!

我把图片发一下,大家看看啊



[ Last edited by zhyzx on 2010-8-24 at 17:05 ]
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rinp

木虫 (正式写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢回复,欢迎常来~~ 2010-08-24 11:01:50
我觉得楼主可以把这两条带都切下来打下质谱看看是否同一个蛋白,如果是的话考虑该蛋白是不是有什么修饰或者少量降解导致出现了两条带,话说你这个很近到底有多进?1,2个kD?还是更少or更多
如果不是同一个蛋白就再纯化一次就是了~~可能是杂蛋白污染或者其他偶然因素~
海到无边天做岸山登绝顶我为峰.博士学位就是鞋里的一粒米,不拿不舒服,拿了不能吃!
19楼2010-08-24 10:20:36
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zhyzx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by puma2003 at 2010-08-22 11:31:16:
正常现象

额,那这蛋白是对的吗?后续试验还可以就这样接着做?
3楼2010-08-22 15:08:42
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有没有把不同批次的蛋白混合在一起?

生物物理?你不会是在点晶体吧,如果是想长晶体这样肯定不行。

蛋白中有几个Cys?
4楼2010-08-22 17:25:08
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无风的小屋

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
什么蛋白啊,有些蛋白质的两个亚基在电泳时会分开
Nocross,nocrown.
5楼2010-08-22 18:16:15
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