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金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】real -time PCR阴性污染问题已有2人参与

最近在做real-time PCR，阴性一直能够扩增出目的条带，换了水，预混液，引物甚至枪头后阴性还是能P出来，苦恼中。。。请教大家如何解决阴性污染问题？

1楼2010-08-21 20:59:10

铜虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):欢迎分享经验。 2010-08-21 22:30:09
amisking(金币+2):欢迎分享经验。 2010-08-21 22:30:39

引用回帖:

Originally posted by Axililiy at 2010-08-21 20:59:10:
最近在做real-time PCR，阴性一直能够扩增出目的条带，换了水，预混液，引物甚至枪头后阴性还是能P出来，苦恼中。。。请教大家如何解决阴性污染问题？

我刚做的时候也是这个样，主要是把水处理好一点，没办法，你只能实验时各步都很小心。我想主要是水，把引物也用新水重新稀释一个。也许就好了。

2楼2010-08-21 21:50:30

木虫 (著名写手)

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amisking(金币+2):鼓励交流！ 2010-08-21 22:30:39

楼主用的模板是什么，如果是菌、质粒等，建议楼主超净台内加混合样，超净台外加模板，任何情况下不要将模板放进超净台
当然，这是在水没有污染的前提下，建议水经常更换，经常灭菌，或者灭菌好分装成小管冻入冰箱

3楼2010-08-21 22:23:29

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