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Axililiy

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】real -time PCR阴性污染问题 已有2人参与

最近在做real-time PCR,阴性一直能够扩增出目的条带,换了水,预混液,引物甚至枪头后阴性还是能P出来,苦恼中。。。请教大家如何解决阴性污染问题?
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):欢迎分享经验。 2010-08-21 22:30:09
amisking(金币+2):欢迎分享经验。 2010-08-21 22:30:39
引用回帖:
Originally posted by Axililiy at 2010-08-21 20:59:10:
最近在做real-time PCR,阴性一直能够扩增出目的条带,换了水,预混液,引物甚至枪头后阴性还是能P出来,苦恼中。。。请教大家如何解决阴性污染问题?

我刚做的时候也是这个样,主要是把水处理好一点,没办法,你只能实验时各步都很小心。我想主要是水,把引物也用新水重新稀释一个。也许就好了。
2楼2010-08-21 21:50:30
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
amisking(金币+2):鼓励交流! 2010-08-21 22:30:39
楼主用的模板是什么,如果是菌、质粒等,建议楼主超净台内加混合样,超净台外加模板,任何情况下不要将模板放进超净台
当然,这是在水没有污染的前提下,建议水经常更换,经常灭菌,或者灭菌好分装成小管冻入冰箱
3楼2010-08-21 22:23:29
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