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小白3521

金虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

[交流] 【求助/交流】关于表达活化时间已有3人参与

诱导表达的时候加1%过夜的菌活化，大概两个小时多点OD550达到0.6了，但是收集菌体感觉不多，以前总是活化三个小时，收集下来的菌体至少是现在的两倍，会不会影响蛋白的表达量呢

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1楼 2010-08-20 09:45:08

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月月大可

木虫 (著名写手)

MolEPI: 3
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专业: 生物化学

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):就是有人说大于1.6就不行了其实看自己的 2010-08-20 13:53:54

我从来不迷信OD0.6

我一般表达的时候OD都在1.6以上，起码我的蛋白很好没有问题。你的自己试试吧。

赞一下(2人)

3楼2010-08-20 10:10:39

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liouwzh

木虫 (正式写手)

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专业: 微生物遗传育种学

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-08-20 13:53:29

如果是E.coli，指导手册里写着OD到0.6就可以诱导了。当然不同的蛋白可能具体的培养时间可以有区别，需通过实验具体分析。

赞一下(2人)

2楼2010-08-20 10:08:02

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adou2008

银虫 (初入文坛)

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专业: 中药内分泌及代谢药理

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+3):鼓励新人回答问题 2010-08-20 13:54:08

培养时间只是个估计，主要是你过夜的菌浓度过高，你还是按1%，活化时间就会缩短。但不影响你的诱导表达。

赞一下(2人)

学习，学习，再学习

4楼2010-08-20 12:39:38

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