24小时热门版块排行榜    

查看: 7187  |  回复: 17

夜龙舞

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励 2010-08-19 16:05:38
转化后不长菌的主要原因是质粒没有进去,而不是放多久的问题。首先看你的质粒的特性,是不是温控质粒,或者其他营养要求的质粒,再就是热激的温度和时间一定要准确,培养基预热等等,转化也是有概率的,多做几次。
11楼2010-08-19 13:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oyanxuelai

银虫 (小有名气)

嗯,非常感谢各位虫友!
12楼2010-08-19 15:00:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

banhf

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要看你连接的片段多大,是否超出载体的容量,如果没有的话就要考虑优化连接体系,一般体系中外源片段的量是载体量的3-4倍
还有一个问题就是感受态,要考虑感受态的效率问题
13楼2010-08-19 17:17:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

保护你的大树

新虫 (小有名气)

我是新手,但是我们实验室的标准是50到100UL,一般就是50,慢慢的涂抹,知道你感觉有一点点阻力为止。
14楼2010-08-23 09:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oyanxuelai

银虫 (小有名气)

感谢各位虫友!PCR产物经过酶切后与同样经过酶切的质粒连接,为什么一直没能转化成功?是不是PCR的酶切的浓度太低,还是其他原因?
15楼2010-08-24 17:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

195251071

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好再涂平板前离心,移走上清,剩余体积为50到100微升的时候涂布比较好,这样放置5分钟就可以了。不长的原因很多啊,你转得是连接产物,那就检查抗性是不是涂错了,如果抗性没有问题,那就可能是你的连接这个环节有问题。
16楼2010-08-25 09:33:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

airzzy

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
放在超净台里吹,至少不能倒置的时候留下来
17楼2010-08-31 18:31:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjzw

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是最好涂干了,不能水汽太大;还有涂布棒要提前烧好凉着,否则会烫死细菌;感受态细胞在加入载体到冰浴的过程中不要在室温放置过久,加入质粒后就去冰浴,加质粒时不用等感受态细胞完全融化,稍微看到有的融化就可以加质粒了,然后去冰浴,自然会融化,在冰浴过程中,间或地摇动,让质粒充分混匀,到热激时就不能摇动,希望对你有帮助。
18楼2012-12-08 19:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 oyanxuelai 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见