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lzw012006

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】高效液相出峰的问题(真心求救) 已有5人参与

等待高人解答:
我的问题是:
我之前用高效半制备接到了一个峰(我做的是蛋白类物质分离),再次上样将收集到的峰进行检测。
洗脱条件为:0-10min ; 5%乙晴-30%乙晴
峰为3min左右出峰
现在问题的关键是我用对照品:水、tris-水、甲醇都出现了这个峰。
而且根据进样量多少,峰高还会有改变。
这个峰在220nm、254nm、280nm都出现了吸收。
那请问问我这个东西到底是怎么回事??到底是我的东西嘛,或者是系统出现问题?然后出现系统峰?再或者是溶剂峰?
很多疑问,但似乎都没办法解释。请前辈们帮解答!
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070918

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-08-18 18:54:41
我感觉应该改变一下洗脱条件,因为你的出峰时间只有3分钟,有点太靠前了,本身前面溶剂峰就多,这样就是问题变的复杂了
天道酬勤
2楼2010-08-18 15:33:16
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lzw012006

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 070918 at 2010-08-18 15:33:16:
我感觉应该改变一下洗脱条件,因为你的出峰时间只有3分钟,有点太靠前了,本身前面溶剂峰就多,这样就是问题变的复杂了

因为之前已经找过条件,在之前的母液中,12分钟左右出峰。现在检测的样品是接出来的。为了减少溶剂损失。所以就调在3min出峰。谢谢您
3楼2010-08-18 15:36:43
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lzw012006

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 070918 at 2010-08-18 15:33:16:
我感觉应该改变一下洗脱条件,因为你的出峰时间只有3分钟,有点太靠前了,本身前面溶剂峰就多,这样就是问题变的复杂了

还有个问题就是,如果是溶剂峰的话。那么280nm 254应该不会出现很强的吸收峰啊?这点是我比较迷惑的地方
4楼2010-08-18 15:38:12
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蓝雪微尘

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恩,不好说,稍微调一下洗脱条件试试看
爱情来的快去的也快,只有猪肉卷才是永恒的~
5楼2010-08-18 16:29:04
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hxl4054

铁杆木虫 (知名作家)

薛定谔的喵星人


wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-08-20 20:02:21
比较复杂   有条件的话换一台仪器试试   柱子也要换     先确定是系统问题还是方法问题
6楼2010-08-19 22:54:40
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lzw012006

新虫 (初入文坛)

自己顶了看看, 这个问题现在还没解决
7楼2010-08-20 15:37:46
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lzw012006

新虫 (初入文坛)

再顶,怕沉了!
8楼2010-08-20 15:38:13
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dingx2005

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
你的Tris在220nm有吸收吗?谢谢!
人就这一辈子,能够从事自己喜欢的事情,并且可以从中获取生活资本,这是非常幸运的事情。
9楼2011-04-23 17:29:04
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