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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】高效液相出峰的问题（真心求救）
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lzw012006

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】高效液相出峰的问题（真心求救） 已有5人参与

等待高人解答：
我的问题是：
我之前用高效半制备接到了一个峰（我做的是蛋白类物质分离），再次上样将收集到的峰进行检测。
洗脱条件为：0-10min ； 5%乙晴-30%乙晴
峰为3min左右出峰
现在问题的关键是我用对照品：水、tris-水、甲醇都出现了这个峰。
而且根据进样量多少，峰高还会有改变。
这个峰在220nm、254nm、280nm都出现了吸收。
那请问问我这个东西到底是怎么回事？？到底是我的东西嘛，或者是系统出现问题？然后出现系统峰？再或者是溶剂峰？
很多疑问，但似乎都没办法解释。请前辈们帮解答！
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1楼 2010-08-18 15:21:43
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070918

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-08-18 18:54:41
我感觉应该改变一下洗脱条件，因为你的出峰时间只有3分钟，有点太靠前了，本身前面溶剂峰就多，这样就是问题变的复杂了
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天道酬勤
2楼2010-08-18 15:33:16
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lzw012006

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 070918 at 2010-08-18 15:33:16:
我感觉应该改变一下洗脱条件，因为你的出峰时间只有3分钟，有点太靠前了，本身前面溶剂峰就多，这样就是问题变的复杂了

因为之前已经找过条件，在之前的母液中，12分钟左右出峰。现在检测的样品是接出来的。为了减少溶剂损失。所以就调在3min出峰。谢谢您
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3楼2010-08-18 15:36:43
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lzw012006

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 070918 at 2010-08-18 15:33:16:
我感觉应该改变一下洗脱条件，因为你的出峰时间只有3分钟，有点太靠前了，本身前面溶剂峰就多，这样就是问题变的复杂了

还有个问题就是，如果是溶剂峰的话。那么280nm 254应该不会出现很强的吸收峰啊？这点是我比较迷惑的地方
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4楼2010-08-18 15:38:12
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蓝雪微尘

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
恩，不好说，稍微调一下洗脱条件试试看
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爱情来的快去的也快，只有猪肉卷才是永恒的~
5楼2010-08-18 16:29:04
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hxl4054

铁杆木虫 (知名作家)

薛定谔的喵星人
★
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-08-20 20:02:21
比较复杂   有条件的话换一台仪器试试   柱子也要换     先确定是系统问题还是方法问题
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6楼2010-08-19 22:54:40
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lzw012006

新虫 (初入文坛)
自己顶了看看， 这个问题现在还没解决
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7楼2010-08-20 15:37:46
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lzw012006

新虫 (初入文坛)
再顶，怕沉了！
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8楼2010-08-20 15:38:13
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dingx2005

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的Tris在220nm有吸收吗？谢谢！
赞一下(1人) 回复此楼
人就这一辈子，能够从事自己喜欢的事情，并且可以从中获取生活资本，这是非常幸运的事情。
9楼2011-04-23 17:29:04
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