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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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feiye2214

木虫 (正式写手)

ATP不知道还在不在?


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我今晚做链接:
连接前鉴定过待连接的片段,没问题(试剂盒连接);
连接16度、45min,跑胶后居然没有带!!
个人觉得:没有连接成功的片段,不是应该也会跑出带吗?怎么会消失呢,降解了??
51楼2010-08-14 20:56:06
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匿名

用户注销 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+5):信任鼓励 常来 2010-08-14 23:51:21
看天(金币-4):不好意思 刚看到区长已经奖励过了 2010-08-14 23:55:36
本帖仅楼主可见
52楼2010-08-14 20:57:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-08-14 20:56:06:
我今晚做链接:
连接前鉴定过待连接的片段,没问题(试剂盒连接);
连接16度、45min,跑胶后居然没有带!!
个人觉得:没有连接成功的片段,不是应该也会跑出带吗?怎么会消失呢,降解了??

连接完的产物要马上转化啊~~怎么能拿来跑胶???
一般情况下连接物只有那么一丁点,跑胶绝对看不见……
53楼2010-08-14 21:16:53
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feiye2214

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-14 21:16:53:


连接完的产物要马上转化啊~~怎么能拿来跑胶???
一般情况下连接物只有那么一丁点,跑胶绝对看不见……

小弟愚昧,多谢指教
我也做了一个4度过夜的,明天转化
54楼2010-08-14 22:08:40
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-08-14 22:08:40:

小弟愚昧,多谢指教
我也做了一个4度过夜的,明天转化

祝成功
55楼2010-08-14 23:36:38
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看天

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by xp198766 at 2010-08-14 19:04:25:

恩,谢谢!这个网站我也去看过,还在研究之中,此外还有biocarta,genmapp等网站也看了下,我找下看有没有做这方面的虫友了……

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-14 18:26:52:


呵呵,这个的话,问做芯片的技术支持最好了,可以约他们面对面交流
http://www.geneontology.org/
这个网址有很多GO的工具和介绍

mark 一下 日后或许会接触分子
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
56楼2010-08-14 23:53:46
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feiye2214

木虫 (正式写手)

ATP在么?


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-14 23:36:38:


祝成功

卡那霉素抗性筛选和蓝白筛选是不是一个作用?
蓝白筛选的机理是什么?是不是在每个质粒上都有相关基因啊?好像培养基中也要加什么东东哦?
57楼2010-08-16 11:29:58
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
lstt09nk(金币+2):辛苦~~ 2010-08-16 21:29:36
看天(金币+1):鼓励一下 2010-08-17 13:36:48
引用回帖:
Originally posted by feiye2214 at 2010-08-16 11:29:58:

卡那霉素抗性筛选和蓝白筛选是不是一个作用?
蓝白筛选的机理是什么?是不是在每个质粒上都有相关基因啊?好像培养基中也要加什么东东哦?

蓝白斑筛选的原理你百度一下都有,具体操作步骤网上也到处都是
用抗生素筛选的话,意思就是能够筛出转化子,但成功转化的不一定含有你的目的基因,有可能是空质粒
蓝白斑筛选就是能够直接从颜色判断哪个克隆是含有插入片段的
不过要你的质粒支持才行
58楼2010-08-16 12:09:27
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by xinguang55 at 2010-08-14 20:57:35:
小生最近在处理真菌的孢子,先已把孢子的内部物质基本清除,只含有细胞壁(乙醇不溶,甲醇和水可以溶解,极性很强)和中间的一个很小的核(显微镜观察),重大小来看因该是核仁,跪求科学达人教我咋用化学方法把它 ...

明明就记得在这里回答过
难道我忘记点提交键?

如果你确定是核仁,用酶消化就好了。DNase和RNase应该足够破坏掉,然后里头肯定会有核蛋白污染的,不过就看你想做什么后续实验了
59楼2010-08-16 21:22:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
看天(金币+2):鼓励一下 2010-08-17 13:37:01
引用回帖:
Originally posted by xinguang55 at 2010-08-14 20:57:35:
小生最近在处理真菌的孢子,先已把孢子的内部物质基本清除,只含有细胞壁(乙醇不溶,甲醇和水可以溶解,极性很强)和中间的一个很小的核(显微镜观察),重大小来看因该是核仁,跪求科学达人教我咋用化学方法把它 ...

不过我说的酶解法,也不一定成,因为要酶能穿透进去才行
我想你可以找找文献看有没有人做过
如果是有现成的经典方法,应该能找到,如果是你新发明的方法,那么你得反复验证确确实实获得了产物而且没有改变其性质之类的
60楼2010-08-16 21:29:12
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