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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

[交流] 【分享】-三磷酸腺苷-答疑专帖,我也来玩~~ 已有39人参与

省得天天翻帖子看啦,直接post到这里~~~

自我介绍一下,我本科4年专业为生物技术,由于是比较基础的学科,所以基本上许多生物学领域的都有接触。现在研转了医学院的药理学,不过对临床医学所知甚少~基础方面由于和生物学想通,所以还是能应付一点

擅长领域:
1、核酸操作:包括纯化、扩增、质粒构建等
2、miRNA、siRNA方面的理论和技术
3、细胞生物学方面的理论和实验,从培养到后续的实验。目前做凋亡,比较熟
4、肿瘤方面:从分子到动物水平理论和技术,临床的不熟……
5、一点点生物信息学的知识
6、简单数据分析,实验设计等案头工作
7、试剂、耗材选购,因为我跟厂商代理商打交道比较多
8、另外杂七杂八的:了解一些生化、微生物方面的
9、另有诡异的问题也希望能够和大家一起探讨



[ Last edited by 三磷酸腺苷 on 2010-8-10 at 12:17 ]
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-09-07 08:51:48:


这得看看是识别什么部位,只要不是识别N端就好了
抗体制备方面我不是很了解,我知道论坛有其他人是做这块的

我也不是自己制备抗体,打算送公司做,但后续的westblot要自己做,现在要自己表达蛋白,不知道该这些冗余序列对后续实验有什么影响

另外,表达去掉信号肽的蛋白,设计引物的时候,该怎么办,难道要顶头设计吗(就是说从需要的氨基酸所在的密码子开始选取序列),这样设计的引物未必好用啊,应该是包含成熟蛋白那样设计吧?但是前面冗余的氨基酸,我又不知道对后续实验是否有影响,说来说去,其实我问的还是一个问题?师兄你告诉我只要不是N端识别的就好,那westblot到底是不是N端识别的呢?

另外我想问一下,酶切位点的序列在设计引物的时候该怎样添加?直接添加在引物前面就行吗?为什么酶切位点很短,但是看别人的论文添加在引物前面的序列都很长?是保护碱基吗?
93楼2010-09-07 21:43:22
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love_st

金虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
三磷酸腺苷同志的解答是非常专业的
2楼2010-08-10 12:38:08
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对于引物设计知道的多么?  或者版内哪个大牛 最会引物设计?
6楼2010-08-10 16:23:26
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greendayguns

铜虫 (正式写手)

呵呵,我也是学生物的,多多指教,多多交流!!!
7楼2010-08-10 16:27:04
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