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三磷酸腺苷铁杆木虫 (职业作家)
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【分享】-三磷酸腺苷-答疑专帖，我也来玩~~ 已有39人参与
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省得天天翻帖子看啦，直接post到这里~~~ 自我介绍一下，我本科4年专业为生物技术，由于是比较基础的学科，所以基本上许多生物学领域的都有接触。现在研转了医学院的药理学，不过对临床医学所知甚少~基础方面由于和生物学想通，所以还是能应付一点 擅长领域： 1、核酸操作：包括纯化、扩增、质粒构建等 2、miRNA、siRNA方面的理论和技术 3、细胞生物学方面的理论和实验，从培养到后续的实验。目前做凋亡，比较熟 4、肿瘤方面：从分子到动物水平理论和技术，临床的不熟…… 5、一点点生物信息学的知识 6、简单数据分析，实验设计等案头工作 7、试剂、耗材选购，因为我跟厂商代理商打交道比较多 8、另外杂七杂八的：了解一些生化、微生物方面的 9、另有诡异的问题也希望能够和大家一起探讨  [ Last edited by 三磷酸腺苷 on 2010-8-10 at 12:17 ] |
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 细胞信号转导 | 核酸生物学实验经验 |
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yujiaping1
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87楼2010-09-06 22:48:14
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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我也不是自己制备抗体，打算送公司做，但后续的westblot要自己做，现在要自己表达蛋白，不知道该这些冗余序列对后续实验有什么影响 另外，表达去掉信号肽的蛋白，设计引物的时候，该怎么办，难道要顶头设计吗（就是说从需要的氨基酸所在的密码子开始选取序列），这样设计的引物未必好用啊，应该是包含成熟蛋白那样设计吧？但是前面冗余的氨基酸，我又不知道对后续实验是否有影响，说来说去，其实我问的还是一个问题？师兄你告诉我只要不是N端识别的就好，那westblot到底是不是N端识别的呢？ 另外我想问一下，酶切位点的序列在设计引物的时候该怎样添加？直接添加在引物前面就行吗？为什么酶切位点很短，但是看别人的论文添加在引物前面的序列都很长？是保护碱基吗？ |
93楼2010-09-07 21:43:22