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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】两种酶的制备
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paulajjh

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】两种酶的制备 已有4人参与

如题，导师让做两种酶，用于后期的实验。但没讲从什么中提取，酶学性质方面的要求。另外，这两种酶目前市场上几乎没的卖（有也垄断了，贵的离谱）。
我之前做过重组菌的酶，但是现在让我从头做起，而且一点方向都不给，
大家能给给建议吗？比如，酶从哪里提，直接提呢还是重组提，原始菌从哪里买，需要哪些耗材、设备等等。
越详细越好。
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1楼 2010-08-07 11:54:23
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-08-07 12:26:38
paulajjh(金币+2):要考虑的问题很多,我都不知道从何种来源去提.谢谢 2010-08-08 15:23:27
要想直接提就先搞清楚定位，是胞外酶还是在胞内还是结合在膜上，分离相应结构，然后过分子筛，再根据性质过离子交换或者其他色谱纯化

要提重组酶得先有菌株，要是没有现成的，还得从克隆开始做。拿到重组菌后诱导表达，根据标签选择不同的亲和柱
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2楼2010-08-07 12:03:31
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chenyyy

无虫 (正式写手)
paulajjh(金币+1): 2010-08-08 15:24:38
叫什么酶呀。。。。
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3楼2010-08-07 13:45:43
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
paulajjh(金币+1): 2010-08-08 15:24:30
你去看看别人做这些酶的时候从哪克隆的
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4楼2010-08-07 22:35:46
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biogefart

木虫 (著名写手)
paulajjh(金币+1): 2010-08-08 15:24:19
标题太大，有些酶很好克隆表达，有些不然
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闹太套
5楼2010-08-07 23:03:22
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