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paulajjh

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】两种酶的制备 已有4人参与

如题,导师让做两种酶,用于后期的实验。但没讲从什么中提取,酶学性质方面的要求。另外,这两种酶目前市场上几乎没的卖(有也垄断了,贵的离谱)。
我之前做过重组菌的酶,但是现在让我从头做起,而且一点方向都不给,
大家能给给建议吗?比如,酶从哪里提,直接提呢还是重组提,原始菌从哪里买,需要哪些耗材、设备等等。
越详细越好。
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-08-07 12:26:38
paulajjh(金币+2):要考虑的问题很多,我都不知道从何种来源去提.谢谢 2010-08-08 15:23:27
要想直接提就先搞清楚定位,是胞外酶还是在胞内还是结合在膜上,分离相应结构,然后过分子筛,再根据性质过离子交换或者其他色谱纯化

要提重组酶得先有菌株,要是没有现成的,还得从克隆开始做。拿到重组菌后诱导表达,根据标签选择不同的亲和柱
2楼2010-08-07 12:03:31
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chenyyy

无虫 (正式写手)

paulajjh(金币+1): 2010-08-08 15:24:38
叫什么酶呀。。。。
3楼2010-08-07 13:45:43
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

paulajjh(金币+1): 2010-08-08 15:24:30
你去看看别人做这些酶的时候从哪克隆的
4楼2010-08-07 22:35:46
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biogefart

木虫 (著名写手)

paulajjh(金币+1): 2010-08-08 15:24:19
标题太大,有些酶很好克隆表达,有些不然
闹太套
5楼2010-08-07 23:03:22
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