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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】非微生物专业的我求助广大的虫虫
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南局幽魂

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】非微生物专业的我求助广大的虫虫 已有6人参与

本人非微生物专业的研究生，一直从事水处理。
    但因，现在的研究方向为      生物除铁除锰。

在看他人论文时，发现有诸多疑问。
   
在此发帖，跪求 高人解答， 一定金币献上，还望大家不吝赐教。

Q1：如果 我要做 除铁除锰细菌的MPN计数,应该参考哪些书籍，资料？？

Q2：我要从接种后的培养基中，通过一系列手段，最后得到高浓度的菌液。
           中间过程如何操作？？同样的，应该参考哪些书籍，资料？？

马上就要开题了，我的试验前期工作完全是微生物实验，头疼的很。

从一楼 了解到了可以 摇瓶之后就简单扩增，但是 扩增后，如果我是一次性接入菌种就会有培养基流入，但是我要得到较纯的菌种，不知道下一步如何操作 ？

[ Last edited by 南局幽魂 on 2010-8-9 at 07:59 ]
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1楼 2010-08-07 08:18:50
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烟大考研

金虫 (正式写手)
南局幽魂(金币+2):你能不能说的更加具体点。 2010-08-07 11:33:24
Q2：从选择培养基中挑取需要的单菌落，通过摇瓶简单扩增就可以得到浓菌液
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
2楼2010-08-07 09:44:47
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南局幽魂

金虫 (正式写手)
求达人相助
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3楼2010-08-07 14:32:19
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zhang2101985

新虫 (初入文坛)
★ ★
看天(金币+2):鼓励新人回答 2010-08-08 11:10:06
南局幽魂(金币+2):之前我也看过别人的步骤，有没有这方面相关的书籍。我想系统的学习一下。 2010-08-08 18:08:10
为了得到浓度较高的菌液你可以先液体发酵培养，然后离心分离，菌体就离心下来了，你想要菌体密度是多少然后计算一下把发酵液倒掉以后加入一定量的水就可以了。
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4楼2010-08-08 09:18:30
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shenfei-

铜虫 (小有名气)
南局幽魂(金币+1):同样谢谢你 2010-08-09 08:12:13
Q1: 对于这个问题，你最好去查阅些资料，下些文献看看。不然即使别人跟你说了，你也太盲目，有时还太偏激；
Q2: 对于这个问题，就得找一种你这株菌最适生长培养基及条件，培养，后离心收集菌体，再用无菌水稀释，达到你要的浓度
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走别人的路，只能让自己无路可走；走自己的路，让别人跟着走
5楼2010-08-09 01:18:00
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xubo04731

银虫 (小有名气)
南局幽魂(金币+2):谢谢你，给我的帮助，有微生物扩培方面的相关书籍吗？？？ 2010-08-09 07:58:35
对于这个问题我以前做过一段时间，不过看楼主的描述，大约的一个思路，摇瓶前必须已经获得足够纯的菌种，因此具体为：
1.取种，你的目标是除铁除锰的话，应该去那种铁锰含量比较高的地方采样，如受两者污染的水域或者是土壤
2.纯化，查找相关的资料，看看用什么培养基进行菌种复筛选，这个得去查，我没做过除铁锰的因此不知道，个人感觉这一步是非常关键的，培养基设计的好可以让你事半功倍
3.再纯化，一次纯化肯定不够，因此得多次，直到能得到较纯的单菌落
4.扩培，得到纯种后就可以进液体试管或者摇瓶了，这时的培养基只需将原来固体培养基中的琼脂去掉就行了
强调一下，纯化是最重要也是最难的，因为不知道你这个除铁锰现在有没有特定的培养基，如果没有就自己设计吧，哈哈，只要能起到选择的作用就可以，加油吧！
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6楼2010-08-09 07:47:02
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xubo04731

银虫 (小有名气)
南局幽魂(金币+1):我找了一下，书籍可能没有什么的，论文中扩配的方法时间太长了 2010-08-09 17:05:52
书籍我倒是没有推荐的，因为单独写扩培的好像很少，主要是我看过的也不多，哈哈，不过你可以参考一些微生物实验方面的书，这个应该会多一些然后还可以看看别人的论文，书中的知识虽然详细，不过不新，而且可能不能与你的课题相符，论文可能会好一些，不过只是个人见解，结合两者效果会好一些
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7楼2010-08-09 08:21:00
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xubo04731

银虫 (小有名气)
南局幽魂(金币+2):再次谢谢你，之前有人设计过培养基，我估计我是要自己再设计培养基了 2010-08-10 13:17:29
扩培时间可能与菌种有关系吧，这个我也不清楚，当时我做的是醋酸菌的筛选、纯化与扩培，当时因为也是不清楚扩培的时间，第一次的时候扩了7天(不是醋酸菌)，结果长了很多，当时我就以为这是正确的，然后后来扩醋酸菌的时候怎么也不能出现以前那种菌很多的情况，我以为是操作错了，又重做了两次，结果还是一样，后来问了一下老师，她说只需扩24小时就行了，时间长了就死了，后来分析了一下，之前的醋酸菌为什么长不多是因为产生醋酸抑制，也就是说扩培的时候得看什么菌，有些菌长的慢的话就时间长些，对于那些会产生分泌物的菌时间不能太长，不然就抑制了
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8楼2010-08-09 22:05:07
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jndxmmc

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
南局幽魂(金币+2):你能不能留下你的QQ ，我和你私聊，谢谢你了 2010-08-11 13:56:12
看了楼主的问题，很有感触。我和你一样，水处理出身，现转行微生物。
其实你的问题很简单，你有选择的下载几篇博士硕士论文，具体的操作方法都有详细的说明 你这么盲目的问 很难得到你想要的答案
MPN计数的文献太多了
你筛选功能菌 选择培养 提DNA PCR 16s测序 系统发育分析 定属 就能出一篇文章
然后做作不同时期的菌群结构变化，也是不错的研究点，希望对你有所帮助
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9楼2010-08-11 11:13:12
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