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nancy1984

木虫 (小有名气)

[交流] HPLC的砂芯漏斗,流动相,柱子保存问题

刚开始进行HPLC实验,同实验室的人都不熟,只有在这求助各位亲爱的虫友了

1.不知道最标准的保存砂芯漏斗的方法是怎么样的。我砂芯漏斗主要过滤的是色谱纯的甲醇,乙晴,和水。我用完砂芯漏斗后,先用三次蒸馏水冲洗几次,然后用干净的纸巾包好,放进塑料袋内,在放抽屉保存。实验室没有什么防尘柜之类的。。。不知道这样可不可以?因为试剂买来的都是MERK公司色谱纯,我觉得应该都是很纯的试剂。

2.我每次都是过虑大约1L的流动相,甲醇,乙晴,和水,放在进口的试剂瓶中。但连续用了两次,也就是两天都用不完。因为试剂很贵,我想以后每次都少过滤一点,500mL应该也够一次用了的。但是一个师兄说,他们实验室每次都用1L的容量。我也不知道他这样子的依据是什么。我现在用完两次,还都留有300mL左右,近几天又不会再用。我想是不是必须倒掉,下次用之前再过滤新的,少过滤些,500ML的量就行。还是就可以放在室温下保存,然后隔几天用之前再超声呢?这样子,感觉瓶子又不干净了。。。大家一般是配多少呢?

3.我是分析有机物质,用C18的反相色谱柱。实验样品测完后,我先用水冲洗30min,在用乙晴冲洗1h,然后柱子就放在HPLC的仪器上,不取下来。因为近期那个仪器都是我用。虽然有时候是隔几天。不知道这样子对柱子影响大不大?还是必须取下来,两端密封保存。

4. 另外,看有的人说,直接买的色谱纯试剂,作流动相时可以不用砂芯漏斗过滤,真是这样子吗?

心随人愿~
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nancy1984

木虫 (小有名气)

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Originally posted by ganchunlei at 2010-08-06 16:31:25:
1. 缓冲液的流动相,用前一定要过滤,可以用5号沙芯漏斗。漏斗用毕要清洗,如果长期不用建议在烘箱中110度烘一烘,起到灭菌作用。

用了含缓冲液的流动相,做完HPLC后,滤头和管道建议用纯水冲洗。


2. HPL ...

虽然很多,但好像不在我问的范围内呢。。
还是谢谢了!
心随人愿~
4楼2010-08-06 19:21:25
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nancy1984

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-07 19:52:01:
1。没那么娇贵,随便放哪都行,摔坏了也不值钱
2。。用多少配多少,1小时60ml,如果做4个小时就是240ml,配300ml就行
3。恭喜你,柱子坏了,C18柱用纯水冲基本可以扔了
4。。很明显不是,色谱纯也必须过滤,所 ...

啊~
我就这么不幸吗。。
心随人愿~
6楼2010-08-08 13:05:14
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nancy1984

木虫 (小有名气)

我的C18柱子被纯水冲洗过了
真的要报废了吗?
好担心啊。。。
看有的使用方法是说先用纯水冲洗30min后再用甲醇或乙晴冲洗保存就可以了啊?
不知道该怎么办了。。。
心随人愿~
8楼2010-08-08 18:46:47
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nancy1984

木虫 (小有名气)

还有有经验的同学补充下好吗?
总感觉大家做的方法似乎都不太一样呢。。。
心随人愿~
9楼2010-08-09 08:00:22
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nancy1984

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by weiyan887 at 2010-08-10 16:54:00:
我当时用的也是C18反相色谱柱,流动相和你的一样,当时流动相由于是色谱纯的用之前都是只超声一下,色谱柱用完之后由于下次还要接着用也并没有冲洗,只是把两头密封好,在实验结束时用甲醇洗的。

买来的色谱纯好多人都建议要再过滤呢。我是这么做的。
色谱柱用完后如果下次分析是同一个样不用冲洗液不好吧。。
下次开机再测试前,不是还得用别的溶剂冲洗的吗?
而且流动相含水的话,不能用来保存色谱柱吧~~
心随人愿~
11楼2010-08-10 19:04:30
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nancy1984

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 桑桑sunshine at 2010-08-11 10:41:12:
一般的C18柱是不能用纯水冲的。挽救办法是用水-甲醇比例慢慢变化,一点点饱和,看能不能救回来

我刚又测了下,貌似柱子还可以用。
决定下次用10%的甲醇来冲洗。
我的测试样品不含盐,应该用不到纯水冲洗吧~~
心随人愿~
14楼2010-08-11 22:57:14
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