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木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有谁做过IL2(白介素2)的纯化?或者类似不带标签的包涵体的纯化 已有2人参与

有谁做过IL2(白介素2)的纯化?
现在蛋白是以包涵体形式存在(不带His),谁能提供以下工艺?谢谢
目前我门做的用尿素溶解,先过阴阳离子柱,现在效果不好,目的蛋白没有集中在一个盐离子梯度下洗脱下来,纯度也不高,谁有更好的方法?

现在情况是:
1. 蛋白溶解效果不好,目的蛋白在酸性条件溶解效果不好,在碱性条件下随着PH的增高,蛋白溶解效果增高。
2. 阳离子柱,目的蛋白都挂柱,在盐离子梯度下洗脱出少量目的蛋白,盐酸胍清柱收集到部分目的蛋白,但是纯度不高。
3. 阴离子柱,目的蛋白50%-60%挂柱,目的蛋白没有集中在某个盐离子梯度下被洗脱下来,而是从开始到结束都有目的蛋白,在50%B洗脱的蛋白纯度较高,但是目的蛋白量少,盐酸胍清柱收集到部分目的蛋白,纯度比阳离子柱高。
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犹怜草木青

木虫 (职业作家)

热心群众铁柱儿


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我做过,效果很好,产量每升差不多20mg
铁柱儿是个温柔的姐姐
2楼2019-09-29 09:20:25
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jidezhong0

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 犹怜草木青 at 2019-09-29 09:20:25
我做过,效果很好,产量每升差不多20mg

大神可不可以交流一下,我现在在读博士也想纯化白介素2
3楼2021-03-20 14:53:40
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