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【求助/交流】有谁做过IL2(白介素2)的纯化?或者类似不带标签的包涵体的纯化 已有2人参与
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有谁做过IL2(白介素2)的纯化? 现在蛋白是以包涵体形式存在(不带His),谁能提供以下工艺?谢谢 目前我门做的用尿素溶解,先过阴阳离子柱,现在效果不好,目的蛋白没有集中在一个盐离子梯度下洗脱下来,纯度也不高,谁有更好的方法? 现在情况是: 1. 蛋白溶解效果不好,目的蛋白在酸性条件溶解效果不好,在碱性条件下随着PH的增高,蛋白溶解效果增高。 2. 阳离子柱,目的蛋白都挂柱,在盐离子梯度下洗脱出少量目的蛋白,盐酸胍清柱收集到部分目的蛋白,但是纯度不高。 3. 阴离子柱,目的蛋白50%-60%挂柱,目的蛋白没有集中在某个盐离子梯度下被洗脱下来,而是从开始到结束都有目的蛋白,在50%B洗脱的蛋白纯度较高,但是目的蛋白量少,盐酸胍清柱收集到部分目的蛋白,纯度比阳离子柱高。 |
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