24小时热门版块排行榜

返回列表

1118

木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2925
散金: 125
红花: 1
帖子: 266
在线: 337.1小时
虫号: 342797
注册: 2007-04-10
性别: GG
专业: 生物化学与分子生物学

[交流] 【求助/交流】有谁做过IL2(白介素2）的纯化？或者类似不带标签的包涵体的纯化已有2人参与

有谁做过IL2(白介素2）的纯化？
现在蛋白是以包涵体形式存在（不带His)，谁能提供以下工艺？谢谢
目前我门做的用尿素溶解，先过阴阳离子柱，现在效果不好，目的蛋白没有集中在一个盐离子梯度下洗脱下来，纯度也不高，谁有更好的方法？

现在情况是：
1. 蛋白溶解效果不好，目的蛋白在酸性条件溶解效果不好，在碱性条件下随着PH的增高，蛋白溶解效果增高。
2. 阳离子柱，目的蛋白都挂柱，在盐离子梯度下洗脱出少量目的蛋白，盐酸胍清柱收集到部分目的蛋白，但是纯度不高。
3. 阴离子柱，目的蛋白50%-60%挂柱，目的蛋白没有集中在某个盐离子梯度下被洗脱下来，而是从开始到结束都有目的蛋白，在50%B洗脱的蛋白纯度较高，但是目的蛋白量少，盐酸胍清柱收集到部分目的蛋白，纯度比阳离子柱高。

回复此楼