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黎亚丽

新虫 (小有名气)

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Originally posted by sunyongle1 at 2010-07-27 09:21:58:
但是浓度大了,也会影响生长的

是,总有一个合适的浓度!
11楼2010-07-27 16:07:28
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by shuiyue2728 at 2010-07-27 09:52:24:
蓝白斑帅选的时候也用IPTG来诱导

这就是IPTG的两个重要用途!
12楼2010-07-27 16:08:14
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Originally posted by 黎亚丽 at 2010-07-27 16:08:14:

这就是IPTG的两个重要用途!

13楼2010-07-27 21:39:15
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hangnan

新虫 (初入文坛)

不太明白啊
14楼2010-07-28 00:03:28
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姜大磊

木虫 (小有名气)


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Originally posted by wdyym at 2010-07-27 09:52:02:
个人经验发现高浓度的IPTG影响大肠杆菌生长,若楼主只是为了验证蛋白是否表达,可以直接用3mM诱导,这个浓度下,一般达到饱和。若已经表达,为了找一个合适的浓度,楼主可以做一个诱导梯度,从而找到最佳诱导浓度

请问一下ITPG在哪里可以买到啊,什么价位啊?IPTG是诱导剂,可以诱导蛋白表达,如果要通过蓝白斑筛选的话是不是需要往培养基里加X–Gal 这个物质啊,谢谢指教!
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
15楼2010-08-04 12:32:35
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wdyym

禁言 (小有名气)

★ ★ ★
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scelab(金币+2):谢谢交流!:tiger06: 2010-08-07 09:42:16
本帖内容被屏蔽

16楼2010-08-07 09:32:06
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yangyonghong

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
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看天(金币+4):鼓励新人交流 2010-08-08 13:27:59
筛选 作为报告基因
诱导  蛋白基因的表达
一定浓度 对蛋白基因的表达进行调控 浓度高低对蛋白基因的表达呈开口向下的一元二次方程曲线 过高会影响其他糖代谢 抑制表达
个人的一点想法 也许对于问题解答 不全面
17楼2010-08-07 21:48:19
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
看天(金币+2):鼓励回答 2010-08-08 13:28:13
不要紧,尽请回答吧,楼主也是刚接触这个,上面所有回答都是有道理的。

就是楼主那个SDS-PAGE。。。。。。。。。。。。。。是变性聚丙烯酰胺凝胶电泳啊,跟IPTG风马牛不相及的,下次别犯错。这个名称问题和IPTG原理百度一下就行了,不用浪费时间在这里等。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
18楼2010-08-08 03:28:16
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姜大磊

木虫 (小有名气)


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Originally posted by wdyym at 2010-08-07 09:32:06:



一般的生物公司都可以买到,生产公司不同,价格也有很大的差异。蓝白斑筛选必须要加X-GAL,你可以在制备平板的时候直接加到培养基里(注意要等培养基降至50度以下再加),也可以在使用之前涂布在平板表面。

请问做蓝白班筛选的时候 ITPG 和 X-GAL  大概需要多大的浓度算合适啊,谢谢。 抽虑后,用的时候直接加入涂在固体培养基上吗?
Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......
19楼2010-09-06 07:36:47
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