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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE凝胶电泳
汕头大学海洋科学接受调剂
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE凝胶电泳 已有13人参与

SDS-PAGE凝胶电泳每一步骤的作用是什么？比如：每隔几小时取出的菌体，离心，沉淀用2倍的SDS-PAGE缓冲液悬浮（意义？），煮沸（作用？）离心，取上清上样，为什么不取沉淀？为什么悬浮后不直接离心？
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1楼 2010-07-26 18:33:06
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by seahow at 2010-07-28 17:58:41:
楼主几乎一点都不知道吗？
建议实验交给公司做做。
我解释如下，可以发贴再交流。不过 你应该注重基础知识；
每隔几小时取出的菌体，离心，沉淀用2倍的SDS-PAGE缓冲液悬浮（意义？），煮沸（作用？）离心，取 ...

您说煮沸后的离心可以省去，如果我不省去的话，上清中是可溶性蛋白，沉淀中有可能是包涵体是吗？
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32楼2010-08-11 14:55:56
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
呃……我觉得你还是去多想想实验的原理吧……
或者站在细菌的角度考虑，这么干会有什么影响
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2楼2010-07-26 18:50:48
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黄大牛

铜虫 (初入文坛)
虾米意思
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
3楼2010-07-26 19:09:40
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烟大考研

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
ATP说的对……你们是不是想测总的蛋白表达量，连细胞内的也一起算上，如果不是这样的话，你们先悬浮，煮沸后离心，这一步就不太正确
赞一下(1人) 回复此楼
心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
4楼2010-07-26 19:15:38
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