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swallow1969

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】一种未知物质的柱层析分离 已有7人参与

我现在做一种未知物质的分离纯化,该物质粗品的紫外吸收大约在254-262之间,用H103大孔树脂进行柱层析分离,在254nm下检测吸收峰,50%的丙酮为洗脱液,可是洗脱过程中只要丙酮一出现,吸收值就很快上升到一个固定值,再也不变了!即便目标物质洗脱完毕,吸收值也不改变,所以想以紫外来确定分离效果的目标一直实现不了!郁闷中,请有经验的大牛指点一二!先谢谢了!
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仰望星空脚踏实地
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liouwzh

木虫 (正式写手)

swallow1969(金币+2): 2010-07-26 10:04:15
是否丙酮试剂有污染,在254nm有吸收,可直接测定50%丙酮洗脱液的吸收值。
2楼2010-07-26 09:37:45
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swallow1969

银虫 (小有名气)

每次都是新配的丙酮做洗脱剂,不应该有污染啊!难道是所用容器的问题?我注意下!
仰望星空脚踏实地
3楼2010-07-26 10:05:39
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huajianjie

木虫 (正式写手)

swallow1969(金币+1): 2010-07-27 08:43:05
树脂用前处理过吗,有时候,填料会带进杂质
4楼2010-07-26 10:21:54
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ygllong

木虫 (正式写手)

swallow1969(金币+3): 2010-07-27 08:43:44
丙酮在紫外区有强吸收,你做个丙酮全波长扫描,分部收集后蒸去丙酮再测定,或用其它洗脱剂
心在路上
5楼2010-07-26 10:50:38
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lyj126

金虫 (小有名气)

swallow1969(金币+1):谢谢! 2010-07-27 08:48:44
可能是样品浓度大了~
6楼2010-07-26 12:43:04
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

swallow1969(金币+2): 2010-07-27 08:44:39
50%的丙酮为洗脱液?怎么想到用这个洗脱的,H103大孔树脂我是没用过这个型号,但是50%的丙酮为洗脱液真是开眼界了,很可能是这个原因
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
7楼2010-07-26 14:11:55
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swallow1969

银虫 (小有名气)

树脂用前已认真做过处理了。用50%丙酮做洗脱液是经筛选确定的,洗脱效果较好。请楼上的大侠指点下,你们用洗脱液如何确定?常用哪些?多谢上面各位指点,还请继续赐教啊!
仰望星空脚踏实地
8楼2010-07-27 08:48:09
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苗静

金虫 (正式写手)

swallow1969(金币+2):谢谢指点! 2010-08-06 09:12:39
建议楼主试一下其它的检测方法。比如硫酸显色、碘熏等。
9楼2010-08-03 16:30:18
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