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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 【求助】一种未知物质的柱层析分离
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swallow1969

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】一种未知物质的柱层析分离 已有7人参与

我现在做一种未知物质的分离纯化，该物质粗品的紫外吸收大约在254-262之间，用H103大孔树脂进行柱层析分离，在254nm下检测吸收峰，50%的丙酮为洗脱液，可是洗脱过程中只要丙酮一出现，吸收值就很快上升到一个固定值，再也不变了！即便目标物质洗脱完毕，吸收值也不改变，所以想以紫外来确定分离效果的目标一直实现不了！郁闷中，请有经验的大牛指点一二！先谢谢了！
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仰望星空脚踏实地
1楼 2010-07-26 08:57:50
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liouwzh

木虫 (正式写手)
swallow1969(金币+2): 2010-07-26 10:04:15
是否丙酮试剂有污染，在254nm有吸收，可直接测定50%丙酮洗脱液的吸收值。
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2楼2010-07-26 09:37:45
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swallow1969

银虫 (小有名气)
每次都是新配的丙酮做洗脱剂，不应该有污染啊！难道是所用容器的问题？我注意下！
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仰望星空脚踏实地
3楼2010-07-26 10:05:39
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huajianjie

木虫 (正式写手)
swallow1969(金币+1): 2010-07-27 08:43:05
树脂用前处理过吗，有时候，填料会带进杂质
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4楼2010-07-26 10:21:54
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ygllong

木虫 (正式写手)
swallow1969(金币+3): 2010-07-27 08:43:44
丙酮在紫外区有强吸收,你做个丙酮全波长扫描,分部收集后蒸去丙酮再测定,或用其它洗脱剂
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心在路上
5楼2010-07-26 10:50:38
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lyj126

金虫 (小有名气)
swallow1969(金币+1):谢谢！ 2010-07-27 08:48:44
可能是样品浓度大了~
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6楼2010-07-26 12:43:04
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
swallow1969(金币+2): 2010-07-27 08:44:39
50%的丙酮为洗脱液？怎么想到用这个洗脱的，H103大孔树脂我是没用过这个型号，但是50%的丙酮为洗脱液真是开眼界了，很可能是这个原因
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
7楼2010-07-26 14:11:55
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swallow1969

银虫 (小有名气)
树脂用前已认真做过处理了。用50%丙酮做洗脱液是经筛选确定的，洗脱效果较好。请楼上的大侠指点下，你们用洗脱液如何确定？常用哪些？多谢上面各位指点，还请继续赐教啊！
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仰望星空脚踏实地
8楼2010-07-27 08:48:09
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苗静

金虫 (正式写手)
swallow1969(金币+2):谢谢指点！ 2010-08-06 09:12:39
建议楼主试一下其它的检测方法。比如硫酸显色、碘熏等。
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9楼2010-08-03 16:30:18
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