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louli

铜虫 (小有名气)

zzq770204(金币+6): 2010-07-31 22:48:20
我们用trizol ,它的效果很好。
11楼2010-07-31 07:48:03
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

zzq770204(金币+10): 2010-08-03 07:12:43
zzq770204(金币+1):如何把握研磨和加TRIzol的时间? 2010-08-03 07:13:28
要RNA浓度高用Trizol提取更好!主要是在研磨和加Trizol的时间上要把握好!
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
12楼2010-08-02 17:02:08
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

zzq770204(金币+10): 2010-08-03 07:12:52
我用的invitrogen 的trizol好像一个小时左右可以提完了,如果你不用DNA酶消化的话。
13楼2010-08-02 20:58:43
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毛毛2802

新虫 (初入文坛)

zzq770204(金币+1): 2010-08-06 16:29:04
我也是用TRIzol提取的,提的是植物组织,时间都能在一个小时内,但是,降解还是比较明显的,28S,18S的条带还是不明显,我很想问问一下11楼的那位,如何把握研磨和加TRIzol的时间啊?先谢谢了
14楼2010-08-02 21:19:18
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mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流,欢迎常来 2010-08-03 09:26:35
zzq770204(金币+10): 2010-08-06 16:28:40
zzq770204(金币+5): 2010-08-06 16:29:22
植物RNA提取:用液氮研磨后应该是略显白色的颗粒状粉末,在没有潮解变绿色水渍状时,将研磨好的样品加到装有Trizol的烧杯中,快速混匀,争取在没有潮解前完全被Trizol浸润。Trizol可以适当过量,因为Trizol可以很好的防止RNA降解。
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起,么有鱼丸粗面。。那,我要鱼丸么有鱼丸那,我要粗面…………么有粗面那,我要鱼丸粗面……………………
15楼2010-08-03 09:06:15
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

zzq770204(金币+10): 2010-08-03 10:58:21
trizol最佳,可以调节浓度

降解的话就是操作原因了
16楼2010-08-03 10:02:03
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毛毛2802

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 毛毛2802 at 2010-08-02 21:19:18:
我也是用TRIzol提取的,提的是植物组织,时间都能在一个小时内,但是,降解还是比较明显的,28S,18S的条带还是不明显,我很想问问一下11楼的那位,如何把握研磨和加TRIzol的时间啊?先谢谢了

谢谢,我多试试看······················额,回复错了

[ Last edited by 毛毛2802 on 2010-8-6 at 23:15 ]
17楼2010-08-06 23:14:40
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毛毛2802

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by mgangle at 2010-08-03 09:06:15:
植物RNA提取:用液氮研磨后应该是略显白色的颗粒状粉末,在没有潮解变绿色水渍状时,将研磨好的样品加到装有Trizol的烧杯中,快速混匀,争取在没有潮解前完全被Trizol浸润。Trizol可以适当过量,因为Trizol可以很 ...

谢谢,我多试试看
18楼2010-08-06 23:15:15
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mxlo.o

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by super1998 at 2010-07-24 15:37:38:
首先不明白你扩增目的基因后为什么要纯化?扩完了可以直接电泳。
如果反转录可以扩增ACTIN,说明模板质量还行,但是没看到你的RNA,也不知道你的材料来源,因此无法确定能否满足建库的要求。
我给你几个建议,如 ...

我用一种真菌提取出RNA后直接进行了反转录,其中1kb的基因能够扩增出来,但是另外一个基因2kb却扩增不出来,如果扩增出来的算是内参基因的话,是不是我的RNA提取没有问题,那为什么我的2kb的扩增不出来呢
19楼2011-12-09 22:32:50
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