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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么用酶最适PH缓冲液提酶酶没有活性？
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springmyqing

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么用酶最适PH缓冲液提酶酶没有活性？ 已有7人参与

本人最近在做酶活测定试验，用PH7.0 Tris-HCL提取酶后在各种PH缓冲液中测酶活，发现在PH5.0时酶活力最大。然后选用PH5.0缓冲液做提取液希望能得到更好的效果，哪知，这样测出的酶没有活力，好纳闷啊？所有其他条件都没有变，最适PH下酶活力不是最大么？酶失活了么？怎么回事呢？
希望各位赐教！谢谢！
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1楼 2010-07-11 22:09:16
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛～
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):agree withyou 2010-07-13 19:59:13
引用回帖:
Originally posted by springmyqing at 2010-07-13 19:13:03:


谢谢回复！我的提取就一步，应该不会有影响的吧？而且有文献在此PH提取液下测出酶活的，国内期刊的，难道会是假的？

不是崇洋媚外，国内的期刊确实会让人怀疑，还是自己摸索的好！
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平和悦衲！
11楼2010-07-13 19:19:22
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
你跑过SDS-PAGE了么，确信你在pH5下能纯化出来？
还有，最好能提供更多地信息，例如你测得是那种酶？有一种可能是虽然活性较高，但稳定性在pH5并不好
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2楼2010-07-11 23:47:58
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看天

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by springmyqing at 2010-07-11 22:09:16:
本人最近在做酶活测定试验，用PH7.0 Tris-HCL提取酶后在各种PH缓冲液中测酶活，发现在PH5.0时酶活力最大。然后选用PH5.0缓冲液做提取液希望能得到更好的效果，哪知，这样测出的酶没有活力，好纳闷啊？所有其他条件 ...

是谁告诉你酶提取的时候一定要在最适PH下呢？
我想知道你从哪儿学到的？
最适PH只是用来反应的时候，确保最大速率的时候这样做的。
提取不一定要在最适PH下，你提取的时候干嘛要保证它酶活最大? 这和酶的保存差不多，保存的时候恰恰是要降低活性的
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
4楼2010-07-12 07:36:09
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看天

木虫 (知名作家)
不过没有酶活不知是你言重了还是真的 如果是真的 确实有点奇异
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
5楼2010-07-12 07:37:08
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