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【求助/交流】pNPG测酶活
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your2007
至尊木虫
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[交流]
【求助/交流】pNPG测酶活
已有15人参与
我用pNPG测酶活,我的酶促反应液在反应过程中没有颜色变化,加了碳酸钠马上变成黄色溶液,不知道怎么回事啊,应该是在没有加入碳酸钠之前就应该有水解产物对硝基苯酚生成啊,期望知道的说说谢谢了
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1楼
2010-07-06 16:00:34
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海梨
新虫
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼
:
Originally posted by
zemin_fang
at 2010-07-06 19:39:40
并不是非要求pH>7才会显色的,没有那么苛刻。但是你加入碳酸钠以后pH都会在11左右,这样可以保证不同pH条件下最终pH一致...
你好( ^_^)/请问ph不同的话,pnp的显色程度会不同吗?
发自小木虫Android客户端
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16楼
2017-05-15 15:57:31
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zemin_fang
木虫
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★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):谢谢交流 2010-07-06 17:38:09
your2007(金币+6):很是谢谢你啊。 2010-07-06 17:40:02
你的反应体系的pH是不是<7??
对硝基酚在碱性条件下才会形成可见的黄色,加入1M碳酸钠的目的就是将反应体系中的pH调整到碱性,让其显色,同时又可以终止酶反应。
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2楼
2010-07-06 16:09:45
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your2007
至尊木虫
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专业: 微生物遗传育种学
引用回帖:
Originally posted by
zemin_fang
at 2010-07-06 16:09:45:
你的反应体系的pH是不是<7??
对硝基酚在碱性条件下才会形成可见的黄色,加入1M碳酸钠的目的就是将反应体系中的pH调整到碱性,让其显色,同时又可以终止酶反应。
嗯,我的反应条是酸性(pH4.5)下进行的,我加入2ml,0.5M的碳酸钠。不过,我用pH6.0的缓冲液也试过,这个在碳酸钠加入之前就能够看到溶液逐渐变黄色。这是为什么呢。谢谢!
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3楼
2010-07-06 17:37:43
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silicare
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your2007(金币
+1
):谢谢参与
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4楼
2010-07-06 17:47:58
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