24小时热门版块排行榜    

查看: 2590  |  回复: 21

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

zzw1221(金币+6): 2010-12-12 23:46:11
引用回帖:
Originally posted by zzw1221 at 2010-07-02 10:21:50:

恩,谢谢了,明天再手提改进下,不行就买一个去了,少壮不努力,长大抽质粒啊

祝实验好运啊,呵呵~
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
11楼2010-07-02 11:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlk1990

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2010-07-01 22:24:17
lz说的这个kit是美国产的,说明书上有两种方法:一种是standard method,其实就是碱裂解+过柱纯化,适用于拷贝数比较高的质粒;另外一种适用于拷贝数低的质粒,碱裂解+乙醇沉淀,但比手工提取的效果要好。其中的任何 ...

兄弟,我今年研一也走上了提质粒的道路。手提两个星期了。碱裂解,第一天提出来了,之后越提越差。最后直接提出来的空白。buffer都换了个遍了。我已经怂了,再提不出来就有被辍学的危险了。大神救我好吗

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2014-08-31 17:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Edenberry

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by jlk1990 at 2014-08-31 17:48:41
兄弟,我今年研一也走上了提质粒的道路。手提两个星期了。碱裂解,第一天提出来了,之后越提越差。最后直接提出来的空白。buffer都换了个遍了。我已经怂了,再提不出来就有被辍学的危险了。大神救我好吗
...

提质粒是很基础的分子实验吧,网上很容易找到相关资料。多练两次,别着急。
13楼2014-09-01 11:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by jlk1990 at 2014-08-31 17:48:41
兄弟,我今年研一也走上了提质粒的道路。手提两个星期了。碱裂解,第一天提出来了,之后越提越差。最后直接提出来的空白。buffer都换了个遍了。我已经怂了,再提不出来就有被辍学的危险了。大神救我好吗
...

不知你提的是多大的质粒?拷贝数多少?
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
14楼2014-09-02 14:05:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlk1990

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhaohq1209 at 2014-09-02 14:05:41
不知你提的是多大的质粒?拷贝数多少?...

我提的也是大肠,插入片段也是120kb,楼主说的那个0mega的试剂盒我买了一个效果也很差。用提普通小质粒的却能提出来,不过量很小,每微升水里边就只有几纳克。也就是说我测序需要1000纳克需要提几百次。
    提质粒已经吐了,老板也不鸟我了,眼神中都是我屁事干不了。大神你真的能救我吗?总之我不论是手提还是试剂盒,质粒是能提出来。但是就是量太小!!!
15楼2014-09-13 19:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlk1990

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by Edenberry at 2014-09-01 11:12:58
提质粒是很基础的分子实验吧,网上很容易找到相关资料。多练两次,别着急。...

不是小质粒,我提的bac,插入片段有120kb,已经提了半个多月了。大神有经验吗?求指点。。。。。
16楼2014-09-13 19:35:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jlk1990

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
大神你最后提出来了吗?有什么经验,手提的还是试剂盒的都行
17楼2014-09-13 19:37:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by jlk1990 at 2014-09-13 19:32:22
我提的也是大肠,插入片段也是120kb,楼主说的那个0mega的试剂盒我买了一个效果也很差。用提普通小质粒的却能提出来,不过量很小,每微升水里边就只有几纳克。也就是说我测序需要1000纳克需要提几百次。
    提质 ...

omega的盒子是提10-100k的么?时间太长,我挤不太清楚了。如果商品化的试剂盒不给力的话,可以尝试用手提的方法。
给你一篇文献参考一下:徐建国,刘志奇,刘汉明。一种简单实用的适于大、小质粒的DNA提取方法。1991,微生物学通报。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
18楼2014-09-18 09:50:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuenyunliu

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用epi公司的pcc1bac啊  加点诱导剂  我擦  那个质粒哇哇的高
手提个10ml多的吓人
19楼2014-09-18 21:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danchengx

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by kuenyunliu at 2014-09-18 21:53:45
用epi公司的pcc1bac啊  加点诱导剂  我擦  那个质粒哇哇的高
手提个10ml多的吓人

咨询一下是什么诱导剂呢?
努力
20楼2015-03-04 09:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员NXfnjV 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见