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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA用水可以溶解吗？
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skyqiuqiu119

木虫 (小有名气)
dldw2008(金币+1):小木虫，我爱你们，谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:52:23
DNA很容易溶于水啊，你要想用水溶解的话，最好用去离子水溶解。
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哎哟~可爱QQ~不错哦~~
11楼2010-07-01 12:13:05
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-07-01 12:42:36
dldw2008(金币+1):其实我是想用纯水来溶解DNA的，谢谢~~ 2010-07-01 14:52:05
pH=8.0的水较好，提质粒时用Elution Buffer溶就可以，若下一步做连接，用8.0的水应该好一些，水溶后保存的时间没有EB保存的时间长
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12楼2010-07-01 12:17:36
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zplipeng

金虫 (著名写手)
dldw2008(金币+1):小木虫，我爱你们，谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:51:00
完全没有问题，不过保存时间不会太长
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
13楼2010-07-01 12:34:06
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
dldw2008(金币+2):小木虫，我爱你们，谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:50:43
lmzxcom1(金币+3):解释的很详细啊，奖励 2010-07-01 19:10:32
引用回帖:
Originally posted by dldw2008 at 2010-07-01 11:31:13:

其实我是想用水来溶解DNA，但有的说在纯水中DNA容易变性，我也不知该怎麽解释，望高手解释一下，为什么DNA可以溶解在水中啊？谢谢啦

DNA有很多极性基团啊，溶于水很正常

在纯水中容易变性？你确定原文说的是是变性而不是降解？
核酸的变性指的是碱基间氢键的断裂，双链的打开，纯水和缓冲溶液都是水性环境，在保持变性状态这一点上应该没有区别。

如果说在水中容易降解倒是说得通。水中残留的DNase可能导致降解，分子生物学意义上的纯水一般是酸性的，磷酸二酯键稳定性稍差一些。TE一方面保证pH在7.5-8左右，另一方面EDTA螯合二价金属离子，抑制DNase活性，防止降解。

但正是因为TE里面含有EDTA（终浓度一般1mM），对下游酶反应（以及其他对离子敏感的操作）可能会有影响，因此核酸短时间的保存可以用水。在从一般纯化、回收时使用的离心柱上回收DNA时，由于硅基质的特性，必须用碱性溶液洗脱时，可以用EDTA浓度0.1mM的TE溶液（EDTA浓度是正常TE的1/10），或直接用10mM的Tris（无EDTA），也可以用碱性水（NaOH调pH）。

长时间保存，或者下一步不再进行酶反应时，还是推荐用TE
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14楼2010-07-01 13:13:39
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狄林

银虫 (小有名气)
dldw2008(金币+1):谢谢~~ 2010-07-01 14:52:35
可以用水溶的
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15楼2010-07-01 14:39:49
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dldw2008

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-07-01 13:13:39:

DNA有很多极性基团啊，溶于水很正常

在纯水中容易变性？你确定原文说的是是变性而不是降解？
核酸的变性指的是碱基间氢键的断裂，双链的打开，纯水和缓冲溶液都是水性环境，在保持变性状态这一点上应该没有 ...

我确信，原话如下
It is well known that dsDNA is denatured in distilled water because of lack of cations to screen the negative charges of DNA
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16楼2010-07-01 14:59:41
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wjw0106

金虫 (小有名气)
dldw2008(金币+1):谢谢参与~~ 2010-07-01 15:18:11
应该可以吧，用做普通PCR反应的模板DNA就可以！
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海阔任我飞！
17楼2010-07-01 15:12:57
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
可以，如果立即使用的话完全没问题
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
18楼2010-07-01 15:32:19
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)
我们在溶解的时候一般都是用水溶解的。
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
19楼2010-07-01 15:36:12
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
lmzxcom1(金币+1):勤劳的版版~ 2010-07-01 19:11:40
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-03 06:16:27
引用回帖:
Originally posted by dldw2008 at 2010-07-01 14:59:41:

我确信，原话如下
It is well known that dsDNA is denatured in distilled water because of lack of cations to screen the negative charges of DNA

我觉得这句话的意思是DNA破坏，而不是双链解开的变性。一般来dsDNA在比较极端的环境下才会变性，比如碱裂解法中的强碱环境，PCR中的94℃变性等。而DNA在水中保存时间较短，主要是与DNase的降解有关。

一般kit中的Elutiong buffer为pH8.0的TE（tris+EDTA），其中tris作为缓冲液可以将EB的pH稳定在8.0，而EDTA作为金属离子螯合剂可以螯合溶液中的金属离子，而金属离子一般是酶作用时必须的，从而抑制了DNase的降解，延长了DNA溶液的保存时间。同时，由于EB中的EDTA浓度并不是很高，用其溶解DNA后进行后续的酶切反应，如PCR、酶切等，与DNA的水溶液并没有太大的差别。

另外，DNA在70℃水或EB中的溶解度大于常温，溶解时可以将其加热，以提高溶解率。

[ Last edited by zhaohq1209 on 2010-7-1 at 15:50 ]
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
20楼2010-07-01 15:49:23
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