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dldw2008

金虫 (著名写手)

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专业: 凝聚态物性 II ：电子结构

[交流] 【求助/交流】DNA用水可以溶解吗？已有26人参与

DNA在水中溶解吗？最好附带几篇参考文献
有人认为DNA在水中容易变性，可我看到一篇文献中，作者就是用水来溶解DNA的，这是怎没回事呢？望大家多多发表自己的看法和见解，谢谢~~~

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1楼 2010-07-01 10:56:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

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专业: 微生物生理与生物化学

★ ★ ★
dldw2008(金币+2):小木虫，我爱你们，谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:50:43
lmzxcom1(金币+3):解释的很详细啊，奖励 2010-07-01 19:10:32

引用回帖:

Originally posted by dldw2008 at 2010-07-01 11:31:13:

其实我是想用水来溶解DNA，但有的说在纯水中DNA容易变性，我也不知该怎麽解释，望高手解释一下，为什么DNA可以溶解在水中啊？谢谢啦

DNA有很多极性基团啊，溶于水很正常

在纯水中容易变性？你确定原文说的是是变性而不是降解？
核酸的变性指的是碱基间氢键的断裂，双链的打开，纯水和缓冲溶液都是水性环境，在保持变性状态这一点上应该没有区别。

如果说在水中容易降解倒是说得通。水中残留的DNase可能导致降解，分子生物学意义上的纯水一般是酸性的，磷酸二酯键稳定性稍差一些。TE一方面保证pH在7.5-8左右，另一方面EDTA螯合二价金属离子，抑制DNase活性，防止降解。

但正是因为TE里面含有EDTA（终浓度一般1mM），对下游酶反应（以及其他对离子敏感的操作）可能会有影响，因此核酸短时间的保存可以用水。在从一般纯化、回收时使用的离心柱上回收DNA时，由于硅基质的特性，必须用碱性溶液洗脱时，可以用EDTA浓度0.1mM的TE溶液（EDTA浓度是正常TE的1/10），或直接用10mM的Tris（无EDTA），也可以用碱性水（NaOH调pH）。

长时间保存，或者下一步不再进行酶反应时，还是推荐用TE