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dldw2008

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】DNA用水可以溶解吗?已有26人参与

DNA在水中溶解吗?最好附带几篇参考文献
有人认为DNA在水中容易变性,可我看到一篇文献中,作者就是用水来溶解DNA的,这是怎没回事呢?望大家多多发表自己的看法和见解,谢谢~~~
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
dldw2008(金币+2):小木虫,我爱你们,谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:50:43
lmzxcom1(金币+3):解释的很详细啊,奖励 2010-07-01 19:10:32
引用回帖:
Originally posted by dldw2008 at 2010-07-01 11:31:13:

其实我是想用水来溶解DNA,但有的说在纯水中DNA容易变性,我也不知该怎麽解释,望高手解释一下,为什么DNA可以溶解在水中啊?谢谢啦

DNA有很多极性基团啊,溶于水很正常

在纯水中容易变性?你确定原文说的是是变性而不是降解?
核酸的变性指的是碱基间氢键的断裂,双链的打开,纯水和缓冲溶液都是水性环境,在保持变性状态这一点上应该没有区别。

如果说在水中容易降解倒是说得通。水中残留的DNase可能导致降解,分子生物学意义上的纯水一般是酸性的,磷酸二酯键稳定性稍差一些。TE一方面保证pH在7.5-8左右,另一方面EDTA螯合二价金属离子,抑制DNase活性,防止降解。

但正是因为TE里面含有EDTA(终浓度一般1mM),对下游酶反应(以及其他对离子敏感的操作)可能会有影响,因此核酸短时间的保存可以用水。在从一般纯化、回收时使用的离心柱上回收DNA时,由于硅基质的特性,必须用碱性溶液洗脱时,可以用EDTA浓度0.1mM的TE溶液(EDTA浓度是正常TE的1/10),或直接用10mM的Tris(无EDTA),也可以用碱性水(NaOH调pH)。

长时间保存,或者下一步不再进行酶反应时,还是推荐用TE
14楼2010-07-01 13:13:39
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glidingwater

银虫 (小有名气)


dldw2008(金币+1):谢谢参与~~ 2010-07-01 11:25:45
lmzxcom1(金币+1):奖励积极交流 2010-07-01 19:08:46
dldw2008(金币+1): 2010-10-16 09:38:17
在DNA胶回收时,若担心洗脱液对下一步实验有影响,常用水洗脱。
即DNA可溶水中,但常温下置放时间长久,可会被水解,导致DNA所谓的变性。
如果社会的黑暗侵蚀了学府,我该往何处?
2楼2010-07-01 11:04:18
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

dldw2008(金币+1):谢谢参与 2010-07-01 11:27:49
提质粒的最后一步就是用水洗脱DNA的啊,当然可以溶解在水中拉。。。但水最好灭过菌,防止被水解酶降解!
3楼2010-07-01 11:19:50
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dldw2008

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by glidingwater at 2010-07-01 11:04:18:
在DNA胶回收时,若担心洗脱液对下一步实验有影响,常用水洗脱。
即DNA可溶水中,但常温下置放时间长久,可会被水解,导致DNA所谓的变性。

麻烦问一下有没有水中DNA溶解度相关的参考文献什么的,最好是英文版的,相关书籍也可以,谢谢啦~~
4楼2010-07-01 11:24:59
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