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dldw2008金虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】DNA用水可以溶解吗?已有26人参与
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DNA在水中溶解吗?最好附带几篇参考文献 有人认为DNA在水中容易变性,可我看到一篇文献中,作者就是用水来溶解DNA的,这是怎没回事呢?望大家多多发表自己的看法和见解,谢谢~~~ |
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ben1147
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dldw2008(金币+2):小木虫,我爱你们,谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:50:43
lmzxcom1(金币+3):解释的很详细啊,奖励 2010-07-01 19:10:32
dldw2008(金币+2):小木虫,我爱你们,谢谢大家~~~ 2010-07-01 14:50:43
lmzxcom1(金币+3):解释的很详细啊,奖励 2010-07-01 19:10:32
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DNA有很多极性基团啊,溶于水很正常 在纯水中容易变性?你确定原文说的是是变性而不是降解? 核酸的变性指的是碱基间氢键的断裂,双链的打开,纯水和缓冲溶液都是水性环境,在保持变性状态这一点上应该没有区别。 如果说在水中容易降解倒是说得通。水中残留的DNase可能导致降解,分子生物学意义上的纯水一般是酸性的,磷酸二酯键稳定性稍差一些。TE一方面保证pH在7.5-8左右,另一方面EDTA螯合二价金属离子,抑制DNase活性,防止降解。 但正是因为TE里面含有EDTA(终浓度一般1mM),对下游酶反应(以及其他对离子敏感的操作)可能会有影响,因此核酸短时间的保存可以用水。在从一般纯化、回收时使用的离心柱上回收DNA时,由于硅基质的特性,必须用碱性溶液洗脱时,可以用EDTA浓度0.1mM的TE溶液(EDTA浓度是正常TE的1/10),或直接用10mM的Tris(无EDTA),也可以用碱性水(NaOH调pH)。 长时间保存,或者下一步不再进行酶反应时,还是推荐用TE |
14楼2010-07-01 13:13:39
glidingwater
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2楼2010-07-01 11:04:18
yangjunzju
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3楼2010-07-01 11:19:50
dldw2008
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4楼2010-07-01 11:24:59













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