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dldw2008金虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】DNA用水可以溶解吗？ 已有26人参与
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DNA在水中溶解吗？最好附带几篇参考文献 有人认为DNA在水中容易变性，可我看到一篇文献中，作者就是用水来溶解DNA的，这是怎没回事呢？望大家多多发表自己的看法和见解，谢谢~~~ |
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zhaohq1209
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lmzxcom1(金币+1):勤劳的版版~ 2010-07-01 19:11:40
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-03 06:16:27
lmzxcom1(金币+1):勤劳的版版~ 2010-07-01 19:11:40
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-03 06:16:27
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我觉得这句话的意思是DNA破坏，而不是双链解开的变性。一般来dsDNA在比较极端的环境下才会变性，比如碱裂解法中的强碱环境，PCR中的94℃变性等。而DNA在水中保存时间较短，主要是与DNase的降解有关。 一般kit中的Elutiong buffer为pH8.0的TE（tris+EDTA），其中tris作为缓冲液可以将EB的pH稳定在8.0，而EDTA作为金属离子螯合剂可以螯合溶液中的金属离子，而金属离子一般是酶作用时必须的，从而抑制了DNase的降解，延长了DNA溶液的保存时间。同时，由于EB中的EDTA浓度并不是很高，用其溶解DNA后进行后续的酶切反应，如PCR、酶切等，与DNA的水溶液并没有太大的差别。 另外，DNA在70℃水或EB中的溶解度大于常温，溶解时可以将其加热，以提高溶解率。 [ Last edited by zhaohq1209 on 2010-7-1 at 15:50 ] |
20楼2010-07-01 15:49:23
glidingwater
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2楼2010-07-01 11:04:18
yangjunzju
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3楼2010-07-01 11:19:50
dldw2008
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4楼2010-07-01 11:24:59
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