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dldw2008

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】DNA用水可以溶解吗?已有26人参与

DNA在水中溶解吗?最好附带几篇参考文献
有人认为DNA在水中容易变性,可我看到一篇文献中,作者就是用水来溶解DNA的,这是怎没回事呢?望大家多多发表自己的看法和见解,谢谢~~~
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
lmzxcom1(金币+1):勤劳的版版~ 2010-07-01 19:11:40
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-03 06:16:27
引用回帖:
Originally posted by dldw2008 at 2010-07-01 14:59:41:

我确信,原话如下
It is well known that dsDNA is denatured in distilled water because of lack of cations to screen the negative charges of DNA

我觉得这句话的意思是DNA破坏,而不是双链解开的变性。一般来dsDNA在比较极端的环境下才会变性,比如碱裂解法中的强碱环境,PCR中的94℃变性等。而DNA在水中保存时间较短,主要是与DNase的降解有关。

一般kit中的Elutiong buffer为pH8.0的TE(tris+EDTA),其中tris作为缓冲液可以将EB的pH稳定在8.0,而EDTA作为金属离子螯合剂可以螯合溶液中的金属离子,而金属离子一般是酶作用时必须的,从而抑制了DNase的降解,延长了DNA溶液的保存时间。同时,由于EB中的EDTA浓度并不是很高,用其溶解DNA后进行后续的酶切反应,如PCR、酶切等,与DNA的水溶液并没有太大的差别。

另外,DNA在70℃水或EB中的溶解度大于常温,溶解时可以将其加热,以提高溶解率。


[ Last edited by zhaohq1209 on 2010-7-1 at 15:50 ]
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
20楼2010-07-01 15:49:23
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glidingwater

银虫 (小有名气)


dldw2008(金币+1):谢谢参与~~ 2010-07-01 11:25:45
lmzxcom1(金币+1):奖励积极交流 2010-07-01 19:08:46
dldw2008(金币+1): 2010-10-16 09:38:17
在DNA胶回收时,若担心洗脱液对下一步实验有影响,常用水洗脱。
即DNA可溶水中,但常温下置放时间长久,可会被水解,导致DNA所谓的变性。
如果社会的黑暗侵蚀了学府,我该往何处?
2楼2010-07-01 11:04:18
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

dldw2008(金币+1):谢谢参与 2010-07-01 11:27:49
提质粒的最后一步就是用水洗脱DNA的啊,当然可以溶解在水中拉。。。但水最好灭过菌,防止被水解酶降解!
3楼2010-07-01 11:19:50
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dldw2008

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by glidingwater at 2010-07-01 11:04:18:
在DNA胶回收时,若担心洗脱液对下一步实验有影响,常用水洗脱。
即DNA可溶水中,但常温下置放时间长久,可会被水解,导致DNA所谓的变性。

麻烦问一下有没有水中DNA溶解度相关的参考文献什么的,最好是英文版的,相关书籍也可以,谢谢啦~~
4楼2010-07-01 11:24:59
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