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汕头大学海洋科学接受调剂
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girlna

金虫 (小有名气)

木虫

[交流] 【求助/交流】到底什么原因? 已有7人参与

我们做边接转化,转化后直接涂皿却没有菌落生长,但是我们把转化的菌在LB中摇上16个小时后再涂皿却有菌落生长,再挑单克隆培养提取质粒却提不出来,有没有哪位朋友遇见过这种情况,分析一下这是什么原因,
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每天进步一点点
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+2):热心回答 2010-06-30 21:53:55
一种可能情况是,你没有把质粒转进去,所以在涂有氯霉素的抗性平板上不能生长提质粒也提不出来;在有氯霉素的LB培养基和抗性平板上能够生长,是不是由于这两种条件下你用的氯霉素的浓度不同,产生了不同的结果,如果排除上述原因,那就是在操作过程中有失误的地方。
5楼2010-06-30 18:03:30
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
情况不好说,很多情况都有~
2楼2010-06-30 16:59:37
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烟大考研

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好楼主说的再清楚点
心信其可行,则移山填海之难,终有成功之日;心信其不可行,则反掌折枝之易,亦无收效之期
3楼2010-06-30 17:07:46
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girlna

金虫 (小有名气)

木虫

dhd997:可以直接在第一楼编辑帖子。 2010-06-30 19:01:52
lmzxcom1:我个人认为LB中的氯霉素不稳定,一般我们都控制抗生素时间的 2010-06-30 19:55:41
就是我们在PNW33N,这个质粒上连接一个Lux基因,转化到感觉态的DH5α空菌中,氯酶素抗性平板在涂皿发现无菌落生长,但是如果我们把转化的菌在添加氯酶素LB培养基中培养16个小时后再涂氯酶素抗性平板有菌落生长,我们就提质粒,但是提不出来,望高手指点
每天进步一点点
4楼2010-06-30 17:29:27
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