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铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】H9c2细胞支原体污染? 已有2人参与

最近我养的H9c2心肌细胞,在细胞表面,及细胞之间的瓶底可看到比细胞小十几倍的小亮点,圆圆的,但好像对细胞的生长没有什么太大的影响,形状也无多大的变化,请问这是支原体感染吗?还是其它的,可以确定不是细胞污染!

一开始以为是培养瓶底问的一些东西,或是显微镜镜头的原因,可是最近发现这种小亮点有增加的感觉,也可能是以前也这么多,没在意。

请问大家,支原体污染在倒置显微镜下能否看得见,若可观察到,是什么样子?
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472514568

至尊木虫 (职业作家)

小木虫议政大臣兼协办大学士


karl2100(金币+1):谢谢指教! 2010-06-24 01:43:12
394210516x(金币+1):谢谢! 2010-06-24 12:16:45
支原体污染可以看到有黑色的,好象多为多形的东西,培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去

另外针对你说的可以看到小亮点 ,还有可能是黑胶虫感染,因为黑胶虫可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,(所以建议你也在高倍镜下观察下)培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。

[ Last edited by 472514568 on 2010-6-23 at 22:16 ]
保持心灵的纯洁
2楼2010-06-23 22:15:14
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铜虫 (小有名气)

这有图!!

最近我养的H9c2心肌细胞,在细胞表面,及细胞之间的瓶底可看到比细胞小十几倍的小亮点,圆圆的,但好像对细胞的生长没有什么太大的影响,形状也无多大的变化,请问这是支原体感染吗?还是其它的,可以确定不是细胞污染!

一开始以为是培养瓶底问的一些东西,或是显微镜镜头的原因,可是最近发现这种小亮点有增加的感觉,也可能是以前也这么多,没在意。

请问大家,支原体污染在倒置显微镜下能否看得见,若可观察到,是什么样子?

看以下的图片(可能不太清楚,手机拍的,但可以看出来)
1.   下载 (156.08 KB)
低倍下,可看到小亮点

12 分钟前这个在一定的焦距下,较少看到小亮点

  下载 (148.48 KB)
调节焦距后

12 分钟前调节了一下焦距

  下载 (151.57 KB)
稍动了一下焦距

12 分钟前

  下载 (62.76 KB)
看箭头就是小亮点

12 分钟前这个比较清楚,看红色箭头,就是小亮点

  下载 (184.49 KB)
这个也看得较清楚小亮点

12 分钟前

  下载 (195.14 KB)
倍数高一点

12 分钟前倍数稍高点

  下载 (161.14 KB)
倍数,焦距

12 分钟前稍调节了一下焦距

  下载 (174.6 KB)
400倍下,调节焦距使细胞和小亮点都呈灰色

12 分钟前400倍下,调节让细胞和小亮点都呈灰色了。

请大家帮忙分析一下,这些小小亮点和细胞有相同的焦距,看细胞亮时它也亮,调节螺母细胞变暗它也变暗。这到底是支原体还是细胞的碎片,还是其它的什么东西,比如血清和培养基里的东西?望大家指点一下,成分感谢了~~

如果是支原体污染,应该怎么办,细胞没了,不能扔,以前冻的时候好像也有亮点。
3楼2010-06-24 22:54:26
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394210516x

铜虫 (小有名气)

请大家查看这个网址,谢谢,有图!

4楼2010-06-24 22:55:47
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5楼2013-04-17 14:39:18
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