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xfchzh

新虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】求助：蛋白质样品浓度比较小，电泳上样量多少合适呀？已有14人参与

大家好，我以前没做过蛋白质电泳，现在样品浓度大概0.1μg/μL，上样量多少比较合适呢？用5X样品缓冲液，添加比例是多少呢？ .yF@Ow
先谢谢大家了！

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1楼 2010-06-23 13:13:12

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邓楠

铁虫 (小有名气)

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专业: 色谱分析

根据样品的复杂程度，上样量可以调节。我平时血清上1ug,银染效果不错。如果是单一蛋白质，银染的话，几百ng就够了。

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13楼2012-05-16 09:46:41

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月月大可

木虫 (著名写手)

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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-23 14:29:31

考蓝染色的分辨率也就是在微克级别（有资料显示100ng），这样浓度你取20微升就会很明显的条带了。
如果需要更大的蛋白量可以取100微升，加10微升Loading Buffer，沸水煮的时候敞开离心管的盖子（管口尽可能高于浮漂，防止水渐入），让其蒸发部分，也能达到浓缩的效果。煮个十几分钟的，然后再敞开盖子晾一会，上样的时候能上多少上多少。

还需要更大上样量只能使用l超滤管浓缩了。我平常嫌麻烦，轻易不这么做。

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2楼2010-06-23 13:35:47

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