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银虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】关于超声破碎细菌~~~ 已有13人参与

1。破碎的程序你们一般用什么：超5秒停5秒？多少轮？功率呢？振幅选多少?
2。超声时一定要放在冰上吗？
3。超声仪持续工作时间最好不超过几分钟？
4。超到澄清才OK？。

这几个问题不知道有人研究过吗?

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1楼 2010-06-22 20:24:54

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bunny0512

银虫 (小有名气)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-25 18:12:37

1。破碎的程序你们一般用什么：超5秒停5秒？多少轮？功率呢？振幅选多少?
   我们用一般的细菌，如大肠沙门之类的，超5停5，功率40W，振幅。。。不知道喂。。
2。超声时一定要放在冰上吗？
   一定哦，要不然细菌内的蛋白会变成煮鸡蛋。。。冰里要放些水，水没过超声杯子液面
3。超声仪持续工作时间最好不超过几分钟？
   仪器应该还好，不至于你超声两个小时细菌还不破碎吧？就是要看着冰不要全化了
4。超到澄清才OK？
   要看你的蛋白是不是可溶的，可溶蛋白比较好超，半小时就可以了，超过半小时如果不澄清，应离心，看是不是有灰白色沉淀，不确定的话，分别把离心上清和沉淀SDS-PAGE检测，如果沉淀里目的蛋白多。。。可怜的呢得到的可就是包涵体了。。