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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【交流】效液相色谱法做的标准曲线
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sirbq

[交流] 【交流】效液相色谱法做的标准曲线 已有2人参与

1 》效液相色谱法做的标准曲线，柱子是（依利特Hypersil BDS C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾（46:54），磷酸调节pH至4.0；检测波长：288 nm；流速：1 mL/min；柱温：38 ℃；进样量：10 μL。做的标准曲线为：Y=18.992X-74.855,r2=0.9984，X是药物浓度（ug/ml）Y是峰面积 截距怎么呢么大呀，一般来说截距应该比斜率小很多，但是我做的怎么截距这么大，各位有做过吗？ 截距大意味着系统误差比较大，改怎么改善呢？
2 》同一份储备液，在稀释的时候，是0.25,0.5,1,2,3,4,5 ml 前面两个浓度是用移液枪取的，后面是用移液管取的，有影响吗？
3》进液相的时候是每个点进一次，还是进两三次取平均值呢?究竟怎样才规范一点？

4》线性范围的最低浓度和最高浓度的范围怎么确定啊？
希望各位虫虫指导一下啊!
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1楼 2010-06-12 21:33:51
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吃小虫的鸡

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
等答案啊，正解
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2楼2010-06-16 23:57:54
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ddw888

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wtf66(金币+1):谢谢参与 2010-06-18 22:06:06
1。这种现象经常有，主要是浓度与响应本就不是正比关系，或有干扰，但也有可能溶液配制问题，若是第一种情况，不一定能改善，若这样含量测定最好采用标准曲线法或两点校正法，或待测样品浓度尽可能与对照品浓度相近
2。要看你用的什么移液枪，有无校正，通常最好统一用移液管，且需标化
3。理论上要取平均值
4。如果是测体外样本，样品浓度的变化不大时，标准曲线范围不需要很宽
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3楼2010-06-17 12:40:46
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