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houhoujiayou

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】柱压老高老高了…… 已有9人参与

哭,用的汉邦C18柱,怎么用10%的乙腈溶液0.1的流速,柱压就飙到了70多啊,郁闷死了,怎么回事啊?高手解救啊!!之前老师就说是柱子被我用坏了,我冲了几天哪,怎么还更严重了啊!
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cg116

木虫 (小有名气)

houhoujiayou(金币+2):谢谢啊,请问用什么溶液反冲会好点啊,还有要冲多久啊,流速多大好点那? 2010-06-10 10:24:51
估计是堵了,你自己试试各个部件(泵、柱子和检测器)看看是哪里堵得,还有汉邦的柱子不行,不耐用,我们用过,你倒过来冲冲看有没有效果,没有的话建议换好柱子吧!还有10%的乙腈本来压力就有点大的。
学习交流!
2楼2010-06-10 09:30:03
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s1d2w2

木虫 (正式写手)

你为什么用10%的乙腈呀 你可以用纯的甲醇或者乙腈呀
3楼2010-06-10 09:32:24
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羽立

如果是柱子的问题,你用高浓度有机相冲啊,如果不行用SDS这样的表面活性剂冲洗,或者低流速反冲。如果是其他问题比如泵头、单向阀、检测器啥的问题,那就另说了
4楼2010-06-10 10:09:26
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yjj1314

金虫 (小有名气)

反冲试试,我上次就是反冲好的,现在用得还行
5楼2010-06-10 10:09:36
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forging

金虫 (小有名气)

houhoujiayou(金币+5):挺具体的,谢谢了啊 2010-06-10 10:22:33
11.柱效丧失和/或高背压
1.        颗粒物积聚在烧结物或者树脂床上(它们都会使背压增高)。如果柱压增高了,将柱子与进样器断开,运行泵,以验证背压的来源确实是来自柱子的颗粒污染(样品、洗脱液和系统)。倒转柱子,以反向的流动来冲洗柱子。如果这样不能解决问题,更换进口过滤器或者筛板。
2.        微生物在洗脱液中生长。倒转柱子,尝试以反向的流动来将污染物冲洗出柱子。更换进口过滤器或者筛板。
3.        有蛋白质脂肪,油脂污染或者极性化合物等污染。再生柱子(见第12节)。

12.再生
1.        再生反相色谱柱
a.        首先倒转柱子。
b.        以大约最佳流速的40%的流速冲洗柱子大约45-60分钟,使用的溶剂的顺序要按照水—甲醇—异丙醇—二氯甲烷—异丙醇—甲醇—水进行。
c.        柱子转回正常方向,使用分析所用洗脱液平衡。
注意:在使用另外的淋洗方法的时候,一定要先用水开始冲洗以去除缓冲液,保证其后的洗脱液可以混溶。
2.        再生硅胶柱
a.        首先倒转柱子。
b.        以大约最佳流速的40%的流速冲洗柱子大约45-60分钟,使用的溶剂的顺序要按照异辛烷(或己烷)—乙酸乙酯—干燥的异辛烷(或己烷)进行。
c.        柱子转回正常方向,使用分析所用洗脱液平衡。
3.再生极性键合柱
取决于使用的条件,可以使用反相的条件,也可以使用硅胶柱的条件。
注意:绝对不要使用酮类或醛类冲洗氨基柱,因为可能与固定相发生反应。四氢呋喃作为替代可以使用。


你试试
6楼2010-06-10 10:20:36
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houhoujiayou

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yjj1314 at 2010-06-10 10:09:36:
反冲试试,我上次就是反冲好的,现在用得还行

能具体说一下吗?比如用什么溶剂,什么比例?还有,反冲就是反着接柱子冲吗?我是生物专业的,对色谱是小白啊,希望说具体点啊,谢谢
7楼2010-06-10 10:21:14
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yjj1314

金虫 (小有名气)

10%的甲醇水溶液,0.5ml/min反冲。是反着接柱子,反冲前要先确保你的柱子是可以反冲的,看看说明书或咨询厂家
8楼2010-06-10 11:13:50
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tianzyl

铁杆木虫 (正式写手)

去中国色谱论坛去注册个号,查查;或者咨询厂家祝福
Nothing is impossible!
9楼2010-06-10 11:38:17
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p2o3

木虫 (正式写手)

换一个柱子试试,先确定哪里堵,再找堵的原因。
10楼2010-06-10 11:38:52
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