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marcia0219

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】如何从筛选cDNA文库?已有3人参与

我想从cDNA文库中筛选目的基因,现在已知该基因的一个片段,大概500bp
能想到的方法就是在这500bp上设计引物,做PCR,然后能批到500片段的单克隆就送测序。问题是,如果这个基因很长,那在某个单克隆里找到全长的机会太小了。而且,这得做多少次PCR,太庞大的工作量。
还有一个就是在500bp上设计一个引物,在载体上再设计一个引物,两头PCR,看能不能接起来。同样,工作量也很大。
我实验做的不多,能想到的就这些了。想请问还有什么其他的思路?谢谢
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-08 21:48:00:
斑点杂交

解释一下具体的
小木虫之有关部门负责人
4楼2010-06-08 23:04:14
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

楼上的方法很实用,
3楼2010-06-08 22:29:40
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