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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】胶质瘤对照设计
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mousekiller

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】胶质瘤对照设计 已有2人参与

因为课题研究人胶质瘤细胞系的基因表达情况，胶质瘤细胞系相对较为好找，像U251之类，但对照组的确定似乎比较麻烦。胶质瘤细胞对应的正常细胞应当是星型细胞（astrocyte），但只能买到原代细胞株，成本较高；未找到低级别胶质瘤细胞系（常见细胞系基本均为GBM来源）；使用成纤维细胞作对照总感觉不太合适。

所以在此请教各位战友，对于胶质瘤对照组设计有没有什么好的建议意见，比如星形细胞的来源，是否有低级别胶质瘤细胞系之类？十分感谢！
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1楼 2010-06-07 12:44:07
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):热心虫友~~感谢交流~~ 2010-06-07 14:44:54
用大鼠模型，正常细胞自己分，肿瘤是C6
或者可以考虑一株叫做HEB的细胞，据说是正常分离的胶质细胞，不是很好找，多去网上搜搜
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2楼2010-06-07 12:47:20
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mousekiller

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-07 12:47:20:
用大鼠模型，正常细胞自己分，肿瘤是C6
或者可以考虑一株叫做HEB的细胞，据说是正常分离的胶质细胞，不是很好找，多去网上搜搜

谢谢指教。

模型还是想使用人胶质瘤模型。另外请教下大鼠的星形细胞好分离么？有没有现成的protocol？如何鉴定？读文献确实有国外学者使用大鼠星形细胞作与人胶质瘤细胞系做为对照，但大鼠与人的基因与蛋白表达存在差异，不是这么设计是否恰当？

HEB的全称应该是human embryonic brain (cell)吧，相关的文献确实不太多，正在找，而且有公司在卖，有机会详细了解一下。
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3楼2010-06-08 00:20:59
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
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Originally posted by mousekiller at 2010-06-08 00:20:59:


谢谢指教。

模型还是想使用人胶质瘤模型。另外请教下大鼠的星形细胞好分离么？有没有现成的protocol？如何鉴定？读文献确实有国外学者使用大鼠星形细胞作与人胶质瘤细胞系做为对照，但大鼠与人的基因与蛋白 ...

神经元不是我分的，我们实验室做神经科学的组弄的，据说就是跟分神经元差不多，不用PLL铺板，让残余的神经元死掉，然后传一代去掉杂细胞就可以用了。
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4楼2010-06-08 10:49:06
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
另外，绝对不可以用大鼠和人的交叉对照，这样根本不是对照，种属差异可以很小也可以很大~~~

HEB我也不知道全称是什么，我也想知道它的来源
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5楼2010-06-08 10:50:10
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mousekiller

木虫 (小有名气)
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Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-08 10:49:06:


神经元不是我分的，我们实验室做神经科学的组弄的，据说就是跟分神经元差不多，不用PLL铺板，让残余的神经元死掉，然后传一代去掉杂细胞就可以用了。

谢谢，我刚在网上找到一个Human Fetal Brain Cell Culture的protocol，其中一部分内容就是： Essentially pure astrocyte cultures can be obtained by plating the cells on uncoated plastic dishes to which very few neurons will adhere，应该是一个概念。用其他方法则可以去除astrocytes获得基本纯的神经元细胞。
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Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-08 10:50:10:
另外，绝对不可以用大鼠和人的交叉对照，这样根本不是对照，种属差异可以很小也可以很大~~~

HEB我也不知道全称是什么，我也想知道它的来源

恩，我也觉得使用大鼠只能陈述现象，做对照很牵强。。

HEB还在找，但如果真是human embryonic brain的缩写，那细胞构成情况与能传多少代都需要落实。。
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6楼2010-06-08 15:37:31
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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scelab(金币+5):high hand~ :tiger23: 专家啊，以后有问题向您请教:tiger23: 2010-06-08 23:01:01
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Originally posted by mousekiller at 2010-06-08 15:37:31:

恩，我也觉得使用大鼠只能陈述现象，做对照很牵强。。
HEB还在找，但如果真是human embryonic brain的缩写，那细胞构成情况与能传多少代都需要落实。。

胶质细胞似乎比较快就成熟，所以胚胎或者成体来源都没太大所谓
这种细胞一般公司保证细胞数量能够10倍增，或者传20代
我在广州找一家叫弗尔博买HEB，本来我这边的动物中心有，但是他们的种子被支原体污染了
公司说周四或者周五给我送过来，到时候我再看看长怎么样
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7楼2010-06-08 17:46:53
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mousekiller

木虫 (小有名气)
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Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-06-08 17:46:53:



胶质细胞似乎比较快就成熟，所以胚胎或者成体来源都没太大所谓
这种细胞一般公司保证细胞数量能够10倍增，或者传20代
我在广州找一家叫弗尔博买HEB，本来我这边的动物中心有，但是他们的种子被支原体污染 ...

但我听说一般星形细胞都是胚胎来源，成人基本养不出来。
商品化的星形细胞声称能够15 doublings，折合下最多也就能传5代，这点让人很难接受。再说原代细胞一般不会超过10代，果真能传20代么？
我搜到的也是同一家公司，看来货源果然很少，期待战友养的结果：）
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8楼2010-06-08 21:07:08
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
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Originally posted by mousekiller at 2010-06-08 21:07:08:


但我听说一般星形细胞都是胚胎来源，成人基本养不出来。
商品化的星形细胞声称能够15 doublings，折合下最多也就能传5代，这点让人很难接受。再说原代细胞一般不会超过10代，果真能传20代么？
我搜到的也是 ...

大鼠的星形胶质细胞是可以用乳鼠来弄的
20代是公司的说法，我也不清楚，不过按照我养大鼠胶质细胞的经验，其实长得很快，甚至比一些长得慢的肿瘤细胞还快，因为它跟神经元是属于竞争关系，一旦没有神经元，这个细胞就会狂长。传代的话，据我的师兄说传十几代都没问题
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9楼2010-06-09 12:54:40
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