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刘蓓蓓

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】高效液相出现倒峰的原因 已有20人参与

最近在做高效液相,流动相是0.1%磷酸水-乙腈,但是在5分钟的时候会出现倒峰,问了老师,老师说不是气泡峰,请问还会有什么情况高效液相会出现倒峰!!
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yangliu2006

银虫 (小有名气)

★
karl2100(金币+1):多谢提供! 2010-06-07 10:58:11
曾经我也遇到过这种现象,总结原因如下:
1、溶剂峰,用流动相定容样品;
2、样品中某物质的吸收值比溶剂背景吸收小;
3、有时在低波长下也会出现倒峰;
4、如用紫外检测器,有没有加参比波长?如果有,去掉参比波长或另选合适的;
5、如用紫外检测器,流量池里是否有气泡产生?
  解决方法:1.抽滤或超声去除流动相里的气泡;
            2、检查在线脱气机(如果有的话);
            3、调节背压。
6、流动相是否在该波长(紫外检测器)有较大的背景?
  解决方法:1、检查你用的溶剂的等级(应为色谱纯);
            2、检查色谱条件的合理性。
7、进样阀切换造成的波动;
8、有负吸收物质;
9、氘灯老化、流通管道或池不通畅、样品和流动相中含有小颗粒;
10、水分引起的。
11楼2010-06-07 08:56:50
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tbczr51

木虫 (小有名气)

★
karl2100(金币+1):谢谢回复! 2010-06-05 16:30:10
刘蓓蓓(金币+1):谢谢!! 2010-06-05 22:38:31
你跑的样品用什么溶液配的,估计是样品与流动相配比的问题,或者是你的柱子没预热平衡
2楼2010-06-05 15:58:25
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liunianlhm

银虫 (小有名气)

★
刘蓓蓓(金币+1): 2010-06-05 22:38:39
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-06-06 20:40:18
有时候样品的溶剂和流动相不一样也有出现。我前段时间用10%甲醇做流动相。样品是用纯甲醇溶的,四五分钟的时候就出现倒峰了。我进了一针纯甲醇,发现又有倒峰。说明可能是溶剂引起的~~~~
3楼2010-06-05 17:20:10
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hjsaga

银虫 (小有名气)

刘蓓蓓(金币+1):水峰吗?可以具体说说嘛? 2010-06-05 22:39:01
是不是就是水峰啊。
君子终日乾乾,夕若易,厉,无咎。
4楼2010-06-05 17:47:18
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