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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC无标准品如何定量
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证明题

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC无标准品如何定量 已有6人参与

我要用HPLC检测一个酶对一个化合物的代谢。已知会代谢成什么样的产物。
但是我没有代谢产物的标准品，也买不到，也没有条件合成。
请问有没有什么办法可以定量？可不可以通过原底物的量的减少来定量？
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1楼 2010-06-05 13:20:32
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cqyc007

金虫 (小有名气)
证明题(金币+1): 2010-06-05 15:39:12
如果你做绝对定量，没有标准品是不行的
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2楼2010-06-05 15:38:26
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证明题

金虫 (正式写手)
那不做绝对定量，退而求其次呢，有什么方法？
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3楼2010-06-05 15:39:02
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yangliu77

木虫 (著名写手)
证明题(金币+1): 2010-06-05 16:46:34
你这个可以用液质联用检测吗？如果可以的话就可以通过质谱定量；如果不能用液质联用测的话，或者说没这条件，那可能只能找跟其代谢物相近的物质充当内标物定量，即采用内标法定量。
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4楼2010-06-05 15:40:56
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cqyc007

金虫 (小有名气)
证明题(金币+1): 2010-06-05 16:46:48
你可以用一个在反应前后不发生变化当内标，发生变化的化合物与之比较便知道变化了多少
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5楼2010-06-05 15:42:51
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证明题

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yangliu77 at 2010-06-05 15:40:56:
你这个可以用液质联用检测吗？如果可以的话就可以通过质谱定量；如果不能用液质联用测的话，或者说没这条件，那可能只能找跟其代谢物相近的物质充当内标物定量，即采用内标法定量。

可以用液质联用检测~~
可不可以详细说怎么通过质谱定量？
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6楼2010-06-05 16:46:21
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prodna

木虫 (小有名气)
内标要知道校正因子的啊
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7楼2010-06-05 17:39:24
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证明题

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by prodna at 2010-06-05 17:39:24:
内标要知道校正因子的啊

详细说说？
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8楼2010-06-05 17:43:51
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追风的蓝刺猬

银虫 (著名写手)
1.你必须确定整个代谢过程产物是唯一的；
2.根据反应方程式用原底物减少的量去推算产物的量。或者你直接用原底物量的变化就可以了。
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我依然站在原地，静候未来......
9楼2010-06-05 17:48:07
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证明题

金虫 (正式写手)
自己顶顶~~
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10楼2010-06-07 21:28:05
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