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csjiang1123

木虫 (小有名气)

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Originally posted by rhy1027 at 2010-06-03 08:16:48:
正常现象!我也碰到过!

你也来分析一下原因呀。呵呵。
11楼2010-06-03 08:42:45
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csjiang1123

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2010-06-03 01:40:57:
EB的电泳方向是与DNA反向的,如果EB都跑光了,DNA也就显示不出来 了,也就以为“跑光了”。

EB不是和DNA结合了吗?难道结合不牢固,EB带正电荷吗?请指教?
12楼2010-06-03 08:44:48
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-06-03 11:11:09
引用回帖:
Originally posted by csjiang1123 at 2010-06-03 08:44:48:

EB不是和DNA结合了吗?难道结合不牢固,EB带正电荷吗?请指教?

是的,EB带正电,会往负极跑(胶的上部),跑的时间长了,DNA跑到胶的下部,而这里EB含量降低,就可能你看不见条带

这种情况只有在EB灌胶的时候加在胶里这种情况才会出现,如果是跑完电泳再染胶,是不会出现这种情况的
13楼2010-06-03 08:51:45
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):好像不是空调师傅的责任吧。 2010-06-03 11:11:42
我有一次是这样的 刚点上样,结果师傅来修空调我就把电泳槽搬着 挪了一个位置,结果再次跑的时候 就什么也看不见了
14楼2010-06-03 09:19:44
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wywangying169

银虫 (小有名气)

没插反电极吧?我有次一粗心,就那样子才几分钟就跑光了。还有可能就是时间太长弥散了~~~~
好好自学,好好工作
15楼2010-06-03 14:20:26
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ququr008

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-06-03 18:58:17
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-03 08:51:45:


是的,EB带正电,会往负极跑(胶的上部),跑的时间长了,DNA跑到胶的下部,而这里EB含量降低,就可能你看不见条带

这种情况只有在EB灌胶的时候加在胶里这种情况才会出现,如果是跑完电泳再染胶,是不会出 ...

DNA分子扩散(如果片段小的话会更厉害);胶不水平(特别是胶薄的时候)电泳时间长,很快就跑出胶了。至于EB结合的问题,不会影响这么大的。EB在电泳初期已经插入DNA,在电泳这一点时间脱出来的可能性还是比较小的。还有什么电泳时间长,溶液温度急剧上升,都是很重要的原因!常常连胶都变形不规则了!
16楼2010-06-03 14:21:55
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-06-03 18:58:57
引用回帖:
Originally posted by ququr008 at 2010-06-03 14:21:55:


DNA分子扩散(如果片段小的话会更厉害);胶不水平(特别是胶薄的时候)电泳时间长,很快就跑出胶了。至于EB结合的问题,不会影响这么大的。EB在电泳初期已经插入DNA,在电泳这一点时间脱出来的可能性还是比较 ...

电泳时间长EB迁移确实不会导致条带不能显色,但是有时候会使条带着色不均,尤其是小分子条带,荧光通常很弱,影响观察,这在现实中是出现过的。至于烧胶,低电压长时间电泳,产热散热比较容易达到平衡,烧胶倒不至于,主要是高电压跑(比如检测RNA的时候,>15V/cm)容易发生,电泳槽要做好散热
17楼2010-06-03 14:28:59
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jingcp200320

银虫 (小有名气)

常见,细节注意了就应该没有问题!@!
18楼2010-06-03 16:33:03
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lstt09nk

铁杆木虫 (职业作家)

小堂

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):good 2010-06-03 23:37:46
引用回帖:
Originally posted by 老夏853 at 2010-06-03 09:19:44:
我有一次是这样的 刚点上样,结果师傅来修空调我就把电泳槽搬着 挪了一个位置,结果再次跑的时候 就什么也看不见了

那是因为搬的过程中缓冲液晃动,而你刚点好样,样品随着缓冲液的晃动飘起来了,飘到缓冲液里面,点样孔没东西了,可不就跑不出来了呗~~所以说,点样后千万不能搬动电泳槽的哦~~
坚持能无数次改变人生的风景,因为只要路是对的,就不怕远~~~
19楼2010-06-03 19:02:03
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csjiang1123

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lstt09nk at 2010-06-03 19:02:03:

那是因为搬的过程中缓冲液晃动,而你刚点好样,样品随着缓冲液的晃动飘起来了,飘到缓冲液里面,点样孔没东西了,可不就跑不出来了呗~~所以说,点样后千万不能搬动电泳槽的哦~~

说得对,点样后不能挪动电泳槽。
20楼2010-06-03 22:45:34
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