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spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】western blot中,蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗,怎么还能和一抗结合?已有12人参与

western blot中,蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗?
天然构想被破坏了,特异性识别位点也被破坏了,怎么还能和一抗结合?
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wangdunzju

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼上几位说的很对,线性表位决定的抗体不受蛋白变性的影响,而空间表位的抗体因为蛋白变性后失去了识别所需的空间结构,从而丧失免疫活性。如果是多抗,它属于混合抗体,一般都能识别变性蛋白;如果是非常特异的单抗,如果它恰好属于空间表位抗体,那么就没法识别变性蛋白,只能识别具有天然构象的蛋白。这样说不知楼主是否可以理解。仅供参考。
14楼2014-02-10 10:25:41
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

前几天听了个讲座,说WB用的抗体在制备过程中就是以变性蛋白为靶标的。

。。。

不知道对不对,仅供参考!
3楼2010-06-01 21:32:43
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郑B.CoA

金虫 (正式写手)

有一些一抗是抗特异氨基酸序列的。。好像叫线性表位。。。变性蛋白会失去三维构象,一抗是可以结合的

[ Last edited by 郑B.CoA on 2010-6-1 at 22:43 ]
4楼2010-06-01 22:41:39
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piupme

铜虫 (小有名气)

抗体与抗原结合的力有好几种,你这时只加一种抗体进入就不会要求特异性了吧,自己感觉。。。
5楼2010-06-01 23:15:41
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