24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 4024  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】western blot中,蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗,怎么还能和一抗结合?已有12人参与

western blot中,蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗?
天然构想被破坏了,特异性识别位点也被破坏了,怎么还能和一抗结合?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
至于是否能够识别不能用嘴巴说的,而是实验才知道的。如果是用蛋白制备的多抗,用于WB检测,还是可以认识的,毕竟多抗是针对多个表位的。但是如果是类似IHC或者IF这样的实验是否一定识别,那就要看运气了,但是从目前来说还是很多这样的抗体是用多抗制备的。所以你可以好好的分析下序列,或者查找相关的文献看看。
52187644
13楼2010-06-11 13:38:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

前几天听了个讲座,说WB用的抗体在制备过程中就是以变性蛋白为靶标的。

。。。

不知道对不对,仅供参考!
3楼2010-06-01 21:32:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郑B.CoA

金虫 (正式写手)

有一些一抗是抗特异氨基酸序列的。。好像叫线性表位。。。变性蛋白会失去三维构象,一抗是可以结合的

[ Last edited by 郑B.CoA on 2010-6-1 at 22:43 ]
4楼2010-06-01 22:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piupme

铜虫 (小有名气)

抗体与抗原结合的力有好几种,你这时只加一种抗体进入就不会要求特异性了吧,自己感觉。。。
5楼2010-06-01 23:15:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见