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spiderboy

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】western blot中,蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗,怎么还能和一抗结合? 已有12人参与

western blot中,蛋白经SDSPAGE后不是变性了吗?
天然构想被破坏了,特异性识别位点也被破坏了,怎么还能和一抗结合?
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奋斗的猪猪

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-06-02 20:59:00:
抗体对抗原的识别无论是空间还是线性表位都是基于氨基酸序列的。一个蛋白在具有三级结构后有连续的表位也会有不连续的表位,而连续的表位也可能和线性的时候一样,所以即使变性了,认识这个部分的抗体还是能过检测 ...

那自己纯化的蛋白制作出来的抗体呢?也有无法识别的可能,该怎么办呢?
12楼2010-06-04 20:32:24
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

前几天听了个讲座,说WB用的抗体在制备过程中就是以变性蛋白为靶标的。

。。。

不知道对不对,仅供参考!
3楼2010-06-01 21:32:43
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郑B.CoA

金虫 (正式写手)

有一些一抗是抗特异氨基酸序列的。。好像叫线性表位。。。变性蛋白会失去三维构象,一抗是可以结合的

[ Last edited by 郑B.CoA on 2010-6-1 at 22:43 ]
4楼2010-06-01 22:41:39
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piupme

铜虫 (小有名气)

抗体与抗原结合的力有好几种,你这时只加一种抗体进入就不会要求特异性了吧,自己感觉。。。
5楼2010-06-01 23:15:41
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