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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【问题反馈】RCA技术
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xuezhaoteng

金虫 (正式写手)

[交流] 【问题反馈】RCA技术

请教大虾们几个问题：滚环扩增中是不是先让引物寡居核苷酸和环模板寡居核苷酸杂交，然后在使环状寡居核苷酸结合成为环状呢？在这儿设计的环模板寡居核苷酸应该是直链状的呢还是环状的呢？另外就是在环化后加热使T4DNA连接酶失火，会不会影响环化产物。
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1楼 2010-06-01 08:25:26
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郭玉娜

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是的，引物与挂锁探针先进性互补配对，引物与挂锁探针都是直链的设计，互补后，T4DNA连接酶16℃连接挂锁探针，65℃变性T4是为了不让其影响下一步聚合酶的工作，不会影响环化产物
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2楼2014-09-23 09:07:17
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介空

金虫 (初入文坛)

笨鸟
你好，你的模版链是怎么设计出来的，要用相关的软件吗
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从一跳到另一个坑，现在努力把自己埋了个坑
3楼2015-01-26 16:55:59
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物语诗欣

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
在进行RCA反应之前要把降模板连成环状，引物和环状的一部分互补杂交。加热使连接酶失活不会破坏环化产物的，很多文献都是这么做的
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4楼2015-11-16 11:17:13
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