24小时热门版块排行榜    

查看: 2048  |  回复: 4
本帖产生 1 个 博学EPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wuweibewin

金虫 (正式写手)

[交流] 利用琼脂糖凝胶电泳鉴定大于50Kb的植物DNA

利用琼脂糖凝胶电泳鉴定大于50Kb的植物DNA所需的条件:
说明电泳中  凝胶浓度、电泳电压、电泳时间等等实验条件即可!

谢绝教科书以及国产来源的资料及文献,要真实可靠的实验过程!
谢谢虫友不吝赐教!
wuwei_hello@163.com
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

conniejing

木虫 (初入文坛)

wuweibewin(金币+14, 博学EPI+1): 2010-06-06 21:26:03
我做的是植物的DNA(紫薇),分子量很大,我当时也做过直接加EB做的,两种方法都可以,如果你提的DNA是纯化的,那就不要担心,按正常的做,适当延长电泳时间就行,但是植物中的多糖多酚太多,很多粘性物质容易粘在DNA上,所以可以考虑降低凝胶浓度和延长电泳时间,减少加样量
5楼2010-06-04 08:42:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

conniejing

木虫 (初入文坛)

wuweibewin(金币+1): 2010-06-08 16:18:02
我用的是100伏的电压,凝胶浓度时0.6-0.8%,时间是一个半小时左右,其实溴酚蓝跑出胶板后过半小时取出,就可以染色拍照了。
2楼2010-05-31 20:40:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuweibewin

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by conniejing at 2010-05-31 20:40:22:
我用的是100伏的电压,凝胶浓度时0.6-0.8%,时间是一个半小时左右,其实溴酚蓝跑出胶板后过半小时取出,就可以染色拍照了。

以往我也用这种方法!但这种方法最多可以鉴定长度约为20kb的DNA,
你可以通过加入λ (Lambda) DNA(线状)和λ (Lambda)E(EcoR1) 比较就会发现,根本就不能用于大于20kb的DNA片段鉴定!!λ (Lambda) 约 位于 λ (Lambda)E(EcoR1)的 最有一条片段处 (20kb)处,实际上λ (Lambda)长为48.5KB!
wuwei_hello@163.com
3楼2010-05-31 20:58:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuweibewin

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by conniejing at 2010-05-31 20:40:22:
我用的是100伏的电压,凝胶浓度时0.6-0.8%,时间是一个半小时左右,其实溴酚蓝跑出胶板后过半小时取出,就可以染色拍照了。

不过我们没有用那么长时间 ,一般我们只用40-50分钟左右即取出,且我们常常通过向胶内加EB,电泳完直接照相!
wuwei_hello@163.com
4楼2010-05-31 21:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +7 wangze12014 2026-08-14 9/450 2026-08-17 14:59 by wangze12014
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +33 医学老男孩 2026-08-13 80/4000 2026-08-17 14:40 by yq199112088
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 6/300 2026-08-17 13:58 by EYK67XJMj64E
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6GojgJvkDudM 2026-08-16 4/200 2026-08-17 13:49 by EYK67XJMj64E
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见