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lanlan_zhu木虫 (著名写手)
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求助翻译【糖化酶】英文文献一篇
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一篇糖化酶的英文文献，急需，希望给位帮帮忙。 文献在邮箱里：guojiazainali@163.com 密码：123456789 |
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2楼2010-05-29 20:21:53
lanlan_zhu
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3楼2010-05-30 12:10:23
cam967
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4楼2010-05-30 15:31:26
lanlan_zhu(金币+20, 翻译EPI+1):非常感谢，不过我今天晚上必须上交，等不了太长时间了。 2010-05-31 09:21:06
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利用糖化酶：绿色荧光蛋白融合蛋白来检测蛋白质在黑曲霉中的分泌 在黑曲霉中，通过构建糖化酶：绿色荧光蛋白融合蛋白以利用荧光蛋白作为蛋白质分泌的报告蛋白质。设计了两种含有不同长度糖化酶的分泌融合蛋白质。分泌表达融合蛋白质发现荧光位于菌丝的细胞壁和菌丝的隔壁中，荧光浓度最高处位于菌丝生长点。通过Western杂交试验仅在培养不久的soya milk medium的上清中发现融合蛋白质。在培养一段时间后，培养基的酸化和蛋白酶的产生可能是胞外和胞壁荧光浓度降低和不能检测到融合蛋白质的原因。一株带有融合蛋白质基因的菌株用UV突变，并筛选分泌通道蛋白质的突变体。筛选到三种不能在淀粉或明胶培养基产生光环（淀粉被消化后会产生环中区域）突变体。这三株突变体与母菌株相比生长较差。荧光显示，在其中的两柱中，融合蛋白质聚集在体内。第三株的荧光在细胞壁中，并没有在胞内发现蛋白的聚集。这些表明构建的融合蛋白能方便的作为荧光标签来研究蛋白质分泌的动态过程并可作为分离分泌通道蛋白质突变体的有效方法。 摘要，如果你还需要，那我只能以后慢慢翻译了。感觉不是很难啊。但我太忙，时间可能比较久的 |
5楼2010-05-31 08:52:41
lanlan_zhu
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6楼2010-05-31 09:19:25
7楼2010-05-31 11:01:06
lanlan_zhu
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8楼2010-05-31 11:38:17
9楼2010-05-31 11:42:01
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丝状真菌具有较强的分泌胞外酶的能力。曾报道在优化的培养条件下，曲霉属和木酶属的一些成员能分别产生20g/L的葡糖糖化酶和40g/L的纤维素酶（(Finkelstein, 1987; Durand et al., 1988)）。另外，由于很多工业开发的菌株是一般被认为是安全的（GRAS），因此很多被用做生产外源蛋白质的宿主。但是很多情况下，外源蛋白质的产量很难超过几毫克每升(Gouka et al., 1997a)。尽管蛋白质分分泌量较低，但在一些情况下，高的mRNA量表明瓶颈可能存在于转录后水平，可能就存在于蛋白质的分泌途径(Jeenes et al., 1994;NyyssoÖnen & KeraÖnen, 1995; Gouka et al., 1996)。借用基因融合策略，把一个感兴趣的外源基因接到同源的分泌量高的蛋白质，虽然融合蛋白质的分泌量仍比同源蛋白质的分泌量的低很多，但这一策略能缓解蛋白质翻译后在转运途径中的限制。(Ward et al., 1990;Contreras et al., 1991; Broekhuijsen et al., 1993; Archeret al., 1994; Gouka et al., 1997b)。 在丝状真菌中，蛋白质分分泌被认为发生在菌丝体的生长点，在这蛋白质通过新合成的细胞壁而绕过了蛋白质在整个细胞中的大量流动（我理解的是避免充满整个细胞，你自己在斟酌一下吧）（(Wessels, 1994)）. WÖsten (1991)等人间接的证明蛋白质的分泌时与菌丝体的生长是相偶联的，虽然黑曲霉的糖化酶位于靠近顶点处，但是糖化酶好像主要在菌丝顶点被分泌(A. Keizer-Gunnink, personal communication)。黄孢原毛平革菌的木质素过氧化酶也被报道过油类似的结果(Moukha et al., 1993)。 来自维多利亚水母的绿色荧光蛋白质已经在多种生物被用作检测基因表达和蛋白质定位的标签(Chalfie, 1995)。荧光蛋白的红移变异体已经被开发出来，其中最大的激发波长被移至490nm，与野生型相比，这产生了更鲜艳的荧光(Heim et al., 1995)。其中一个变异体的合成版本（S65T，sGFP）已经在植物中应用(Chiu et al., 1996; Haas et al., 1996)，并在多种真菌中得到成功表达，其中包括白念珠菌，构巢曲霉，出芽短梗霉和玉蜀黍黑粉菌(Spellig et al., 1996; Cormack et al., 1997; Suelmann et al., 1997; van den Wymelenberg et al., 1997; Fernandez-Abalos et al., 1998; Siedenberg et al., 1999)。 在本文研究中，我们描述在黑曲霉中表达融合蛋白质糖化酶（GLA）：：荧光蛋白质（sGFP）,并以此作为生长菌丝中蛋白质分泌的报告蛋白质。结果充分证明了此融合蛋白质可作为蛋白质转运的报告蛋白质和可作为筛选蛋白质分泌通道蛋白质突变体的工具。 下午吃完饭回来给你方法部分 |
10楼2010-05-31 15:03:24
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